【摘 要】
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目的 探究长链非编码RNA LINC00665通过靶向微小RNA(microRNA,miR)-138/AKT1促进Hela细胞增殖和抑制凋亡的机制.方法 分析TCGA数据库中宫颈癌患者miR-138水平与生存之间的关
【机 构】
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河北北方学院附属第一医院 妇产科,河北 张家口075002
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目的 探究长链非编码RNA LINC00665通过靶向微小RNA(microRNA,miR)-138/AKT1促进Hela细胞增殖和抑制凋亡的机制.方法 分析TCGA数据库中宫颈癌患者miR-138水平与生存之间的关系.通过双荧光素酶报告验证LINC00665靶向miR-138和miR-138靶向AKT1.将宫颈癌细胞系Hela分为4组:对照组、mimic组、mimic+LINC00665组和LINC00665组,通过质粒转染技术过表达miR-138和/或LINC00665.分别通过qPCR和Western blot检测RNA和蛋白的水平.分别通过CCK-8法和流式细胞术检测各组的细胞活力和凋亡率.通过荷瘤裸鼠实验在体内验证miR-138和LINC00665对肿瘤生长的影响.结果 在TCGA数据库中,miR-138高表达的宫颈癌患者的生存率显高于miR-138低表达患者(P<0.05).LINC00665直接靶向miR-138,miR-138直接靶向AKT1.Mimic组的miR-138水平显著高于对照组,LINC00665、AKT1 mRNA和蛋白水平显著低于对照组(P<0.05).LINC00665组miR-138水平显著低于对照组,LINC00665、AKT1 mRNA和蛋白水平显著高于对照组(P<0.05).mimic+LINC00665组的miR-138水平显著低于mimic组,LINC00665、AKT1 mRNA和蛋白水平显著高于mimic组(P<0.05).mimic组的细胞活力显著低于对照组,细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05),LINC00665组的细胞活力显著高于对照组,细胞凋亡率显著低于对照组(P<0.05).mimic+LINC00665组的细胞活力显著高于mimic组,细胞凋亡率显著低于mimic组(P<0.05).miR-138组荷瘤裸鼠的肿瘤体积和质量均显著低于对照组(P<0.05),miR-138+LINC00665组肿瘤体积和质量显著高于miR-138组(P<0.05).结论 miR-138靶向抑制AKT1的表达,LINC00665直接靶向miR-138,并且可通过靶向miR-138促进AKT1的表达.LINC00665通过靶向调控miR-138/AKT1促进Hela细胞的增殖并抑制凋亡.
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