【摘 要】
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目的:探讨荧光PCR探针熔解曲线法(简称“熔解曲线法”)与微孔板法检测利福平药物敏感性试验(简称“药敏试验”)结果不一致的原因,为临床基因型与表型药敏结果不一致提供解释.方法:收集2019年8月至2020年9月西安市胸科医院收治的分枝杆菌培养阳性的结核病患者资料,共2562例,筛选同时进行利福平熔解曲线法耐药基因检测和微孔板法表型药敏试验且结果不一致的菌株1294株.通过对rpoB基因测序,分析不一致结果与rpoB基因突变位点的相关性.结果:54例(4.17％,54/1294)熔解曲线法与微孔板法检测结果
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目的:探讨荧光PCR探针熔解曲线法(简称“熔解曲线法”)与微孔板法检测利福平药物敏感性试验(简称“药敏试验”)结果不一致的原因,为临床基因型与表型药敏结果不一致提供解释.方法:收集2019年8月至2020年9月西安市胸科医院收治的分枝杆菌培养阳性的结核病患者资料,共2562例,筛选同时进行利福平熔解曲线法耐药基因检测和微孔板法表型药敏试验且结果不一致的菌株1294株.通过对rpoB基因测序,分析不一致结果与rpoB基因突变位点的相关性.结果:54例(4.17％,54/1294)熔解曲线法与微孔板法检测结果不一致的患者中,45例为熔解曲线法检测突变型而微孔板法检测敏感,8例为熔解曲线法检测野生型而微孔板法检测耐药,1例熔解曲线法检测出异质性耐药,未纳入分析.其中rpoB基因在507～512位密码子发生突变时,其与微孔板法结果不一致率最高,为70.59％(24/34),且不一致的菌株在微孔板法中最低抑菌浓度(MIC)的测定值多分布在≤1 μg/ml.Leu511Pro是观察到不不一致菌株最多的突变位点,占45.28％(24/53),其次观察到较多的突变位点是Leu533Pro,占所有不一致菌株的15.09％(8/53),Asp516Tyr和His526Asn突变率均为5.66％(3/53).8例熔解曲线法检测敏感而微孔板法检测耐药的菌株进行测序,结果显示rpoB基因区域未发生突变.结论:rpoB基因Leu511Pro、Leu533Pro、Asp516Tyr和His526Asn位点突变是造成临床结核分枝杆菌基因型与表型药敏结果不一致的主要原因,但其是否与低水平耐药机制有关还需要进一步研究.
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