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目的
应用聚合酶链反应(PCR)、限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)及测序技术，建立检测不同属种细菌的16S-23SrRNA基因区间的特异图谱。
方法对临床上常见的细菌进行PCR扩增、RFLP、分子克隆及序列分析，同时对临床标本进行培养与PCR-RFLP比较。
结果27株不同细菌行PCR扩增后，得到不同DNA图谱。其中15种细菌经PCR扩增即可区分，另10种经Hinf I或Alu I酶切后才能区分。肺炎克雷伯菌与坚韧肠球菌的差异只在第779位碱基上不同，Xma III酶能区别。42例临床诊断为新生儿败血症者，15例培养阳性，阳性率35.7%；而PCR阳性者则为27例，阳性率为64.29%，明显高于血培养(P<0.01)。6例脑脊液标本中，1例PCR及培养均阳性(表皮葡萄球菌)；2例培养阴性标本，其PCR也阳性；经图谱分析为葡萄球菌，1例培养为新型隐球菌的脑脊液标本PCR检测为阴性。另2例PCR及培养均阴性。
结论建立了PCR-RFLP技术快速检测细菌16S-23S rRNA基因区间的方法，具有特异、敏感、快速、准确的特点，为临床细菌感染的病原诊断提供新的科学依据。