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目的
探讨RNA激活技术上调p21WAF1/CIP1基因的表达而影响人肝癌细胞株BEL–7402的增殖和凋亡能力。
方法将与p21WAF1/CIP1基因启动子区域DNA序列互补的RNA分子(dsP21–322)转染入BEL–7402细胞中,采用qPCR法及Western印迹方法检测p21WAF1/CIP1的表达;采用WST–1细胞增殖试剂检测细胞增殖情况;使用流式细胞仪评估肿瘤细胞凋亡情况并使用Western印迹方法检测相关分子表达水平的变化。
结果dsP21–322转染72 h后,BEL–7402细胞中p21WAF1/CIP1表达显著上调;细胞增殖受到明显抑制,凋亡率36.86%(细胞的体积变小、变形,细胞核固缩,染色质凝聚呈深染,细胞出现皱缩、变圆、脱落)较对照组(11.51%、14.06%)相比明显升高。
结论RNA激活技术靶向上调p21WAF1/CIP1基因表达并抑制细胞增殖、增加诱导肿瘤细胞凋亡,可作为肝细胞癌或其他恶性肿瘤基因治疗的一种有效手段。