【摘 要】
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目的探讨时间和剂量对脂多糖(LPS)刺激小鼠腹腔巨噬细胞TLR2/4mRNA表达的影响。方法常规提取和培养小鼠腹腔巨噬细胞。时效实验,加入终浓度为1μg/ml LPS,分别刺激1,3,6,12 h
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目的探讨时间和剂量对脂多糖(LPS)刺激小鼠腹腔巨噬细胞TLR2/4mRNA表达的影响。方法常规提取和培养小鼠腹腔巨噬细胞。时效实验,加入终浓度为1μg/ml LPS,分别刺激1,3,6,12 h后取材;量效实验,分别加入终浓度为0.00,0.01,0.1,1,10μg/ml LPS,3 h后取材。小鼠腹腔巨噬细胞TLR2/4 mRNA的表达采用RT-PCR进行。结果①在LPS 1μg/ml剂量下6 h内,随着时间的延长,TLR2/4mRNA的表达量逐渐上升,与空白对照组相比有显著性差异(P<0.05,P<0.01);但刺激时间达12 h时,细胞开始脱壁、死亡。②在LPS 0.01~1μg/ml剂量范围内,随着LPS浓度的增加,TLR2/4mRNA的表达量逐渐上升,呈一定剂量依赖关系,与空白对照组相比有显著性差异,(P<0.05或P<0.01);但当LPS浓度达10μg/ml,TLR2/4 mRNA的表达量反而下降。结论用LPS体外刺激小鼠腹腔巨噬细胞,在0.01~1μg/ml浓度范围内,在1~6 h时间内,其TLR2/4 mRNA的表达呈现出一定的时效与量效关系,该研究可为今后的研究者提供有益的时间和剂量参考。
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