探讨存活蛋白(survivin)对贝伐珠单抗治疗的人脑胶质瘤细胞增殖及侵袭能力的影响。
方法体外常规培养人胶质母细胞瘤系U87细胞,MTT法检测0、2、4、6、8、10 mg/mL贝伐珠单抗(Bev)分别作用2、4、6 d后细胞增殖能力的变化。将U87细胞分别转染空载体(pRNAT)、针对survivin基因的shRNA真核表达载体(pRNAT-survivin shRNA)、无关插入序列载体(pRNAT-NS si),分别为U87/pCtrl细胞、U87/sur(-)细胞和U87/NS si细胞。将上述细胞和U87细胞培养1 d后,均加入6 mg/mL Bev作用1 d,分别为U87+Bev组、U87/sur(-)+Bev组、U87/pCtrl+Bev组、U87/NS si+Bev组,同时设不加Bev的U87、U87/sur(-)组作为对照。MTT法测定各组细胞的增殖能力;划痕实验检测细胞的迁移能力,Transwell实验检测细胞的侵袭能力。
结果与0 mg/mL Bev组比较,8、10 mg/mL Bev组的U87细胞接种后2、4、6 d细胞数均降低,差异有统计学意义(P< 0.05);与U87+Bev组相比,U87/sur(-)+Bev组的细胞数降低,差异有统计学意义(P<0.05);与U87/sur(-)组相比,U87/sur(-)+Bev组的细胞数降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与U87组相比,U87+Bev组细胞的迁移距离明显延长,差异有统计学意义(P<0.05);与U87+Bev组相比,U87/sur(-)+Bev组细胞的迁移距离缩短,差异有统计学意义(P<0.05);与U87组相比,U87+Bev组细胞进入下室的细胞数量增多,差异有统计学意义(P<0.05);与U87+Bev组相比,U87/sur(-)+Bev组细胞进入下室的细胞数量减少,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论抑制survivin可明显抑制Bev处理后胶质瘤细胞侵袭性的增强,并与Bev产生协同效应,抑制胶质瘤细胞的增殖。