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【目的】研究分离和纯化板栗下胚轴原生质体的影响因素。【方法】对分离板栗下胚轴原生质体的酶液组合、酶解时间、渗透压调节剂等因素进行优化，采用荧光增白剂（CFw）染色法和荧光素双醋酸酯（FDA）染色法分别对原生质体去壁和原生质体活力进行检测。【结果】分离板栗下胚轴原生质体最适宜的酶液组合为13％（w／v）甘露醇＋2％（砌）纤维素酶＋0．5％（w／v）离析酶＋1％（舶）半纤维素酶，28℃温度下酶解6h，原生质体产量达5．8x10个·g-1，且活力达94％。蔗糖浓度为23％（w／v）时，原生质体纯化效果