【摘 要】
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红曲霉的次级代谢产物Monacolin K具有降血脂的功效.Mok E基因是Monacolin K生物合成基因簇中的一个基因,为研究mok E基因与Monacolin K产量的相关性,将mok E基因克隆并
【机 构】
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天津科技大学食品工程与生物技术学院食品营养与安全教育部重点实验室 天津300457
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红曲霉的次级代谢产物Monacolin K具有降血脂的功效.Mok E基因是Monacolin K生物合成基因簇中的一个基因,为研究mok E基因与Monacolin K产量的相关性,将mok E基因克隆并通过35s启动子将该基因过表达,采用PCR及测序的方法验证转化子；利用高效液相色谱(HPLC)法对野生型及转化子Monacolin K产量进行检测；通过RT-qPCR方法,对高产Monacolin K的三株转化子Monacolin K生物合成基因簇进行分析.结果表明：T3及T4转化子菌落变红,T6转化子菌落变白；T5、T6、T8转化子菌落产生褶皱.T2,T8,T9转化子Monacolin K产量分别为2159.7 mg/kg,4177.6 mg/kg,3365.7mg/kg,约为野生型(1447.8 mg/kg)的1.5倍,3倍,2倍.与野生型相比,T2,T8,T9转化子mok E基因的表达量分别是野生型的4.82倍,2.22倍及1.87倍.Monacolin K生物合成基因簇中其他基因表达水平也有不同程度提高.这些结果表明,mok E基因过表达可以增加Monacolin K生物合成基因簇的表达水平,提高Monacolin K的产量,但单一mok E的表速量与Monacolin K产量无正相关性.
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