【摘 要】
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本研究旨在建立一种同时检测犬巴贝斯虫(Babesia canis)和犬埃立克体(Ehrlichia canis)的双重纳米PCR(nano-dPCR)检测方法。根据GenBank上登录的犬巴贝斯虫18S rRNA序列和犬
【机 构】
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广西大学动物科学技术学院; 广西大学动物医院;
【基金项目】
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广西自然科学基金(2018GXNSFDA281026);国家自然科学基金(31660653);广西科技计划重点研发项目(桂科AB16380098)
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本研究旨在建立一种同时检测犬巴贝斯虫(Babesia canis)和犬埃立克体(Ehrlichia canis)的双重纳米PCR(nano-dPCR)检测方法。根据GenBank上登录的犬巴贝斯虫18S rRNA序列和犬埃立克体16S rRNA序列分别设计一对特异性引物,并对双重纳米PCR的退火温度和引物浓度等反应条件进行优化。结果显示,所建方法的特异性和灵敏性良好,对犬巴贝斯虫和犬埃立克体的最低核酸检测量分别为2.07×10~4和1.92×10~4copies/μL,其灵敏性比普通PCR高10倍。为了解南宁地区犬巴贝斯虫和犬埃立克体的流行情况,采用该方法对来自南宁市宠物医院的152份血清样品进行检测,结果显示,犬巴贝斯虫和犬埃立克体的阳性率分别为2.63%和9.87%,混合感染阳性率为1.32%。本试验建立的双重纳米PCR方法为犬巴贝斯虫和犬埃里克体早期快速、准确、灵敏的诊断提供了新方法,并为犬巴贝斯虫和犬埃里克体的防控奠定了基础。
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