酶解血粉制备工艺的优化及其结构特性的研究

来源 :中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十一次全国动物营养学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:twffhvknnh
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  本试验通过对酶制剂产品的状况和国内外研究进展,选择了六种蛋白酶酶制剂用于酶解处理血球粉,探讨蛋白酶酶解处理对血球粉蛋白结构的影响.利用单因素分析和响应面旋转中心组合设计,以水解度为研究对象,得到了6种蛋白酶酶解血球粉的最佳工艺条件,分别为(1)中性蛋白酶:pH值=6.50、温度为45℃、E/S=0.1129、时间为12h,得到的水解度为35.060 2(理论值是35.130 4%);(2)酸性蛋白酶Ⅰ: pH值=3.05、温度为50.8℃、E/S=0.545 6、时间为16h,得到的水解度为69.94(理论值为70.08%); (3)酸性蛋白酶Ⅱ:pH值=4.00、温度为50℃、E/S=0.182 0、时间为12h,得到的水解度为45.39(理论值为45.42%);(4)胃蛋白酶:pH值=1.00、温度为30℃、E/S=0.057 9、时间为16h,得到的水解度为26.69(理论值为26.77%);(5)碱性蛋白酶:pH值=10.00、温度为50℃、E/S=0.026 6、时间为12h,得到的水解度为86.22(理论值为86.28%);(6)胰蛋白酶:pH值=8.98、温度为55℃、E/S=0.1835、时间为6h,得到的水解度为61.39(理论值为61.41%).经过SDS-PAGE电泳发现,未处理的血球蛋白主要在条带分布主要有10~15kDa、25 ~ 40kDa和70kDa附近的3条带,而经过蛋白酶酶解处理后,大部分的蛋白含量都在10kDa以下.蛋白酶酶解处理的血球粉的色度都得到改善,且碱性蛋白酶脱色效果最好.以各自的最佳工艺条件制备得到的六种酶解血球粉产品,利用凝胶渗透色谱-激光光散射联用法(GPC-MALS)法来测定蛋白的绝对分子量,结果发现:随着蛋白酶水解度的增大,蛋白分子质量逐渐变小,中性蛋白酶、酸性蛋白酶Ⅰ、酸性蛋白酶Ⅱ、胃蛋白酶、碱性蛋白酶和胰蛋白酶在0 ~ 5kDa分子质量所占的洗脱体积为15.53%、64.76%、46.23%、10.82%、98.10%和83.22%.以上研究结果表明:血球粉经蛋白酶酶解处理后,其大分子蛋白被酶解成肽类物质,同时酶解处理也起到了很好的脱色效果,有利于血球粉在动物饲料中的利用.
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