【摘 要】
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目的：本研究通过胃癌组织和MGC-803胃癌细胞探讨14-3-3β蛋白与胃癌淋巴结转移的关系,并进一步讨论14-3-3β蛋白是否通过Raf蛋白促进淋巴结转移的机理.方法：利用Western Blotting检测MGC-803胃癌细胞中14-3-3β蛋白和Raf蛋白、P-Raf蛋白的表达,利用siRNA技术转染MGC-803胃癌细胞,qRT-PCR、Western Blotting检测敲低YWHAB
【机 构】
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胃肠外科,哈尔滨医科大学附属第三医院,哈尔滨,150086
【出 处】
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第9届全国胃癌学术会议暨第二届阳光长城肿瘤学术会议
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目的：本研究通过胃癌组织和MGC-803胃癌细胞探讨14-3-3β蛋白与胃癌淋巴结转移的关系,并进一步讨论14-3-3β蛋白是否通过Raf蛋白促进淋巴结转移的机理.方法：利用Western Blotting检测MGC-803胃癌细胞中14-3-3β蛋白和Raf蛋白、P-Raf蛋白的表达,利用siRNA技术转染MGC-803胃癌细胞,qRT-PCR、Western Blotting检测敲低YWHAB基因表达对Raf蛋白、P-Raf蛋白表达的影响；利用CCK-8检测YWHAB-siRNA对MGC-803胃癌细胞增殖能力的影响；收集172例胃癌石蜡标本,利用免疫组化技术检测14-3-3β蛋白在胃癌组织中的表达和与淋巴结转移的关系,及14-3-3β与P-Raf蛋白表达的相关性分析.结果：在胃癌细胞系MGC-803中,14-3-3β蛋白和Raf、P-Raf蛋白均为高表达.YWHAB-siRNA可有效降低14-3-3β蛋白在MGC-803中的表达,并明显抑制P-Raf蛋白表达,对Raf蛋白没有影响.CCK-8在MGC-803的检测结果显示,siRAN实验组与control组、NC对照组,1ipo2000对照组比较,细胞增值能力明显降低(P＜0.01).根据免疫组化结果,将172例胃癌组织标本分为14-3-3β蛋白低表达组64(37.21％)例,14-3-3β蛋白高表达组108(62.79％)例,按照临床病理资料,根据淋巴结转移情况分为淋巴结转移阴性组55(31.98％)例和淋巴结转移阳性组117(68.02％)例,结果显示14-3-3β高表达时,阳性淋巴结转移81(75.00％)明显高于阴性淋巴结转移率27(25.00％)； 14-3-3β低表达时,淋巴结转移阴性28 (43.75％),淋巴结转移阳性36(56.25％)(P＜0.05)； 14-3-3β蛋白表达与P-Raf蛋白表达关系密切(P＜0.001).结论：14-3-3β蛋白促进MGC-803胃癌细胞增殖,降低14-3-3β蛋白表达可下调P-Raf蛋白的表达,14-3-3β蛋白可能通过P-Raf蛋白参与胃癌淋巴结转移.
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