AMPK活化介导荷叶生物碱干预脂毒性的研究

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高能量密度饮食伴现代静息生活方式致肥胖高发,与我国代谢性疾病和心脑血管疾病高发密切相关,游离脂肪酸致多组织器官糖脂代谢障碍是其共同病理基础。荷叶具清暑化湿,升发清阳,凉血止血之功效,作为药食同源植物,被广泛用作降脂、减肥食品,但是其活性物质基础和生物学机制仍不明确。腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)作为代谢应激调控的关键分子,在调控糖脂代谢方面起关键作用,课题组证实AMPK信号通路活化障碍可加剧心肌缺血再灌注损伤,AMPK活化继而激活内皮型一氧化氮合酶(eN OS)介导了小檗碱改善油酸所致大鼠血管内皮功能障碍。荷叶高脂减肥作用或与调控AMPK活化相关。我们使用高速逆流色谱(HSCCC)法成功地得到四个主要的荷叶阿朴啡生物碱,包括原荷叶碱(pronuciferine)、荷叶碱(nuciferine)、莲碱(roemerine)和2-羟基-1-甲氧基阿朴啡(2-hydroxy-1methoxyaporphine)。利用鸡尾酒法诱导小鼠胚胎成纤维细胞3T3-L1分化为胰岛素抵抗的成熟脂肪细胞模型,检测了以上荷叶碱对脂肪细胞葡萄糖摄取和脂质代谢的影响。结果发现,4种化合物均不同程度促进葡萄糖的摄取,其中以原荷叶碱和2-羟基-1-甲氧基阿朴啡作用最强。在进一步探讨其作用机制的研究中,发现原荷叶碱能显著抑制胰岛素抵抗的3T3-L1脂肪细胞的脂滴生成,降低细胞内甘油三酯含量,上调GLUT4的膜转位从而加强细胞的葡萄糖摄取,其作用与触发成熟的3T3-L1脂肪细胞中AMPK的磷酸化紧密相关。以上研究表明,荷叶中的生物碱可通过活化AMPK信号通路,改善成熟脂肪细胞的糖脂代谢,或是其调脂减肥作用的生物学基础。
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