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目的制备一种新型包裹紫杉醇的微泡一双配体载紫杉醇纳米粒复合物,并对其生物学性能进行检测。方法以肝素为原料,碳二亚胺法制备生物素化连接叶酸、穿膜肽、包裹紫杉醇的肝素纳米粒,动态光散射仪测定其粒径及电位,透射电镜观察其形态,紫外分光光度计测定载药量。采用机械震荡法制备生物素化脂质微泡。借助生物素一亲和素桥接作用将二者偶联,制备复合物体系,激光共聚焦显微镜观察Oregon green绿色荧光标记的双配体载药纳米粒与Dil红色荧光标记的脂质微泡的连接效果,库尔特粒度分析仪进行粒度分析。分别以1mg/mL,2mg/mL,3mg/mL的双配体紫杉醇纳米粒与脂质微泡孵育构建脂质微泡一双配体紫杉醇纳米粒复合物,计算双配体紫杉醇纳米粒与微泡的结合率及复合物的载药量。分别以流式细胞分析仪定量分析及激光共聚焦显微镜定性分析双配体紫杉醇纳米粒、脂质微泡.双配体紫杉醇纳米粒复合物联合超声辐照、脂质微泡.双配体紫杉醇纳米粒复合物无超声辐照作用对叶酸受体阳性表达的人乳腺癌MDA-MB-231细胞及叶酸受体阴性表达的人肺癌A549细胞纳米粒摄取情况,细胞毒性试验评价各组作用后细胞存活情况。结果肝素纳米粒的粒径为120nm,电位为-35mV,电镜观察呈球形,大小均匀,分散度好,载药量为8.84%。激光共聚焦观察较多肝素纳米粒成功连接在微泡表面。库尔特粒度分析仪测定微泡浓度为(11.31±1.0)×108个·mL-1,粒径为(2.20±0.93)μm,复合物的浓度为(7.78±1.2)×108个·mL-1,粒径为(2.26±0.86)μm。激光共聚焦显微镜下见Oregon green绿色荧光标记的双配体紫杉醇纳米粒与Dil红色荧光标记的脂质微泡外壳连接成功。双配体紫杉醇纳米粒的浓度为2mg/mL时,脂质微泡一双配体紫杉醇纳米粒复合物的载药量最高,即每108个复合物载紫杉醇的量为106.7μg。两种细胞对荧光的摄取量在脂质微泡-双配体紫杉醇纳米粒复合物联合超声辐照组最多,在脂质微泡-双配体紫杉醇纳米粒复合物无超声辐照组最少。MDA-MB-231细胞内绿色荧光明显强于A549细胞,且绿色荧光主要分布在MDA-MB-231细胞的细胞核内,A549细胞的细胞质内。以上两种细胞内荧光强度在脂质微泡-双配体紫杉醇纳米粒复合物联合超声辐照组最强,在脂质微泡-双配体紫杉醇纳米粒复合物无超声辐照组最弱。作用24h后MDA-MB-231细胞及A549细胞的相对存活率依次为空白微泡联合超声辐照组>小分子紫杉醇组>双配体紫杉醇纳米粒组>脂质微泡.双配体紫杉醇纳米粒复合物联合超声辐照组(P<0.05)。结论成功制备具有较好药物运载性能的新型微泡.双配体载紫杉醇纳米粒复合物。超声辐照作用及叶酸、穿膜肽修饰复合物体系,能够协同促进肿瘤细胞对载药纳米粒的摄取,从而抑制肿瘤细胞生长。