研究目的 :维持骨髓造血干细胞(HSC)的稳定状态是抗结核免疫的基础。为探讨抗原持续刺激对HSC稳态的影响,本课题利用卡介苗(BCG)初免,结核分枝杆菌抗原ESAT6、CFP10和Mtb10.4-HspX (MH)联合佐剂DDA和Poly I:C持续刺激,模拟结核分枝杆菌持续感染,建立T细胞耗竭及骨髓HSC功能障碍的小鼠模型,并在此基础上研究IL-2对T细胞耗竭及HSC功能障碍的治疗作用。方法 :应用结核分枝杆菌抗原MH等持续刺激小鼠,通过流式细胞术、细胞因子胞内染色法检测脾脏CD4~+T淋巴细胞分泌IFN-γ的水平和抗原特异性的记忆性CD8~+T细胞的数量、EdU增殖试验检测骨髓HSC样细胞的增殖能力、RT-PCR检测骨髓祖细胞中转录因子的表达水平,分析T细胞和HSC样细胞的数量及功能。用IL-2干预,检测治疗效果。结果 :成功建立T细胞耗竭及HSC功能障碍动物模型,发现抗原持续刺激12或22周后,脾脏中TB10.4特异性的记忆性CD8~+T细胞数量减少,HSC样细胞增殖能力降低;抗原持续刺激12周,脾脏CD4~+T细胞受特异性抗原刺激分泌较高的IFN-γ水平,骨髓微环境中也有较高水平的IFN-γ,但最终呈下降趋势。与此相一致,骨髓祖细胞中转录因子的表达水平也发生了变化:决定髓系分化的IRF8上调,而促进T细胞谱系分化的NOTCH1下调。IL-2治疗可逆转IRF8和NOTCH1的表达,恢复HSC样细胞的增殖能力,进而逆转了T细胞耗竭。结论 :结核分枝杆菌抗原持续刺激过程中IFN-γ持续增高造成HSC耗竭;补充IL-2可恢复HSC的稳态,进而扭转T细胞耗竭。