【摘 要】
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目的:本文以不同组成的卵白蛋白溶液为研究对象,研究了脉冲电场作用下蛋白质之间的相互作用,并且研究了溶菌酶与其他蛋白质之间的聚集机制.方法:对不同组成的蛋白溶液体系
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目的:本文以不同组成的卵白蛋白溶液为研究对象,研究了脉冲电场作用下蛋白质之间的相互作用,并且研究了溶菌酶与其他蛋白质之间的聚集机制.方法:对不同组成的蛋白溶液体系进行了PEF处理(25 kV/cm,0-800 μs),通过浊度与可溶性蛋白含量的方法研究了蛋白质宏观性质的变化,通过凝胶色谱与电泳对聚集类型、作用力和组成成分进行了表征.结果:通过25 kV/cm,800μs处理的卵白蛋白和溶菌酶溶液均未发现有明显聚集形成.然而,在卵白蛋白溶液(0.2%)中添加溶菌酶(0.05%)后经过脉冲电场处理,二者之间通过经静电相互作用和二硫键形成了不溶性聚集,聚集现象与多蛋白体系一致.SDS-PAGE结果显示PEF处理后形成的不溶性聚集物中溶菌酶、卵白蛋白和卵铁传递蛋白含量分别为34.4%,36.2%和24.1%,通过添加NEM封闭巯基对抑制聚集无明显效果.讨论:研究发现,在PEF处理过程中,静电相互作用为多蛋白溶液体系中(存在带有相反电荷的蛋白质体系)不溶性聚集形成的非常重要的作用力,而封闭巯基无法达到抑制聚集形成的效果.据此我们推测多蛋白体系中不溶性聚集的形成可能是由于PEF作用加速了带电粒子的运动,从而创造了更多的机会让粒子之间发生了聚集.
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