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猪肺表面活性蛋白A是猪肺泡表面活性蛋白中含量最多、最先被发现具有炎症免疫调节功能的表面活性蛋白。本研究通过PCR和直接测序法对猪SP—A基因全序列进行了SNP筛选,用PCR—RFLP方法对相关位点在中外猪种中的基因频率进行了研究,并利用长白猪群体进行了标记性状关联分析。同时,对中外猪种SP—A和SP—D基因的组织表达谱进行了比较研究。结果如下:
1,在SP—A基因中共获得5个SNP位点,其中C1396A、G1833C和A2395G位点是限制性内切酶酶切位点,用于进一步研究:
2,SP—A基因C1396A位点在所有猪种中均表现较高的A基因频率,其中国外猪种杜洛克猪和大白猪群体表现为单一的AA型;国内猪种五指山猪、槐猪、东山猪、玉山黑猪和蓝塘猪表现为AA型和AC型,缺少CC型个体。G1833C位点在所有猪种中G基因频率较高,其中槐猪全为GG型,其他猪种中表现为GG和GC型,缺CC型。A2395G位点在大白猪、蓝塘猪、桂中猪、屯昌猪和槐猪中表现为AA型和AG型,缺乏GG基因型。
3,SP—A基因G1833C位点对1日龄的红细胞(RBC)水平、17日龄的淋巴细胞绝对值(LYM#)和大血小板体积(MPV)、32日龄的伪狂犬病毒抗体水平(PRV Ab)和淋巴细胞绝对值(LYM#)有显著影响(P<0.05),对1日龄的大血小板体积(MPV)和大血小板比率(P_LCR)、17日龄的伪狂犬病毒抗体水平(PRV Ab)有极显著影响(P<0.01)。A2395G位点对17日龄的淋巴细胞(LYM%)、红细胞分布宽度(RDW)和大血小板体积(MPV)、32日龄的伪狂犬病毒抗体水平(PRV Ab)、淋巴细胞(LYM%)和红细胞分布宽度(RDW)有显著影响(P<0.05),对1日龄长白群体的平均血红蛋白浓度(MCHC)、淋巴细胞(LYM%)和中性粒细胞(NEUT%)有极显著影响(P<0.01)。
4,SP—A基因和SP—D基因在长白猪、蓝塘猪和大花白猪的肺组织中表达量普遍高于其他组织表达量。肝组织中表达量明显高于除肺组织外的其他组织。长白猪各个组织表达量比蓝塘和大花白猪高。