【摘 要】
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心血管疾病(Cardiovascular diseases,CVD)发病率和死亡率极高,血管移植是临床上治疗CVD的理想手段,但迄今为止临床上尚无可以医用的小口径(口径<6 mm)人工血管产品。小口径人工血管不能应用的重要原因之一是血液相容性差,因此迫切需要提高小口径人工血管的血液相容性。肝素是临床上常用的抗凝血剂,然而作为一种间接的凝血酶抑制剂,容易引起血小板减少、骨质减少、血管钙化等副作用。与
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心血管疾病(Cardiovascular diseases,CVD)发病率和死亡率极高,血管移植是临床上治疗CVD的理想手段,但迄今为止临床上尚无可以医用的小口径(口径<6 mm)人工血管产品。小口径人工血管不能应用的重要原因之一是血液相容性差,因此迫切需要提高小口径人工血管的血液相容性。肝素是临床上常用的抗凝血剂,然而作为一种间接的凝血酶抑制剂,容易引起血小板减少、骨质减少、血管钙化等副作用。与肝素相比,比伐卢定(Bivalirudin,BV)是一种直接凝血酶抑制剂,与凝血酶的结合是可逆的,凝血过程不需要其他辅助因子的参与,能够更加安全、可靠的发挥抗凝血作用。在本研究中,将BV和聚己内酯(Poly(ε-caprolactone),PCL)在甲醇/氯仿溶液中进行充分混溶,设计并制备出负载BV的人工血管。在体外研究中,扫描电子显微镜(Scanning electron microscope,SEM)结果显示,与PCL人工血管相比,BV的负载不会改变纤维直径、孔隙率等微观结构。力学测试结果也表明,BV负载不会对人工血管的应力应变曲线、爆破压和缝合强度产生影响。BV的负载率约为87.34%,可实现体外长达30天的持续释放。对PCL和PCL-BV人工血管的抗凝性能进行了研究。体外凝血分析显示,BV的负载降低了凝血酶的活性,进而显著地延长激活部分凝血活酶时间(Activated partial thromboplastin time,APTT)、凝血酶原时间(Prothrombin time,PT)、凝血酶时间(Thrombin time,TT),同时降低了纤维蛋白原(Fibrinogen,FIB)和血小板的粘附和激活,很大程度上抑制血栓的形成。在凝血称重实验中,通过测量凝血斑块重量进一步证明BV负载抑制了血液凝固。溶血实验和C3a补体激活ELISA实验结果显示BV不会引起溶血和补体激活,能够安全的发挥其抗凝作用。在兔子AV-Shunt实验中,PCL人工血管管腔内全部形成可见血栓,而PCL-BV人工血管管腔内光滑无血栓沉积,实现了100%的通畅率。将PCL-BV人工血管移植到兔子颈动脉进行进一步分析。移植三天后,PCL人工血管50%因形成血栓而堵塞,另外50%也在管腔内形成了不同程度的血栓凝块,而PCL-BV组则100%通畅,管壁光滑无凝血斑块。移植一个月后,PCL人工血管全部堵塞,而PCL-BV人工血管的通畅率达到了60%,且通畅的PCLBV人工血管再生性良好,实现了内皮细胞和平滑肌细胞覆盖。综上所述,将BV负载到PCL人工血管中能够有效地抑制凝血酶的活性,避免血小板及FIB的粘附和激活,抑制血栓的形成,显著地提高血液相容性和通畅率。
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