【摘 要】
：
[目的]牙周炎是一种慢性感染性疾病,导致牙周结缔组织和支持牙齿的骨组织破坏,是导致成年人牙齿缺失的主要原因之一。牙周炎的传统治疗方法,主要是去除局部刺激因素和炎症的控制。低功率激光是一种非侵入性的治疗方法,具有抗炎、止痛、促进局部组织再生的能力等作用,在牙周疾病的治疗中已有应用,但其对宿主细胞的影响及其具体的作用机制有待深入研究。本研究旨在探讨低功率激光照射对牙周膜干细胞的增殖和成骨向分化的影响,
【基金项目】
：
国家自然科学基金地区科学基金项目（40112024）；
论文部分内容阅读
[目的]牙周炎是一种慢性感染性疾病,导致牙周结缔组织和支持牙齿的骨组织破坏,是导致成年人牙齿缺失的主要原因之一。牙周炎的传统治疗方法,主要是去除局部刺激因素和炎症的控制。低功率激光是一种非侵入性的治疗方法,具有抗炎、止痛、促进局部组织再生的能力等作用,在牙周疾病的治疗中已有应用,但其对宿主细胞的影响及其具体的作用机制有待深入研究。本研究旨在探讨低功率激光照射对牙周膜干细胞的增殖和成骨向分化的影响,并对影响机制进行初探。[方法]1.使用酶解组织块法培养牙周膜干细胞,通过有限稀释法进行纯化,使用流式细胞术、免疫荧光和多向分化诱导对培养的牙周膜干细胞进行鉴定;2.使用低功率激光对牙周膜干细胞进行照射,CCK-8法检测其增殖情况;使用qRT-PCR增殖相关基因PCNA和KI67的表达;EdU染色标记增殖细胞;使用流式细胞术检测细胞周期;筛选本实验条件下激光照射的最佳能量密度;3.碱性磷酸酶活性检测和茜素红染色检测成骨分化能力;Western Blot检测低功率激光对牙周膜干细胞BSP、ALP、OCN和COL-1蛋白的表达进行检测;4.转录组测序寻找低功率激光照射后差异表达基因,对差异表达基因进行GO富集分析,KEGG通路分析,对测序结果进行验证。[结果]1.使用酶解组织块培养法,5-7d时见细胞从组织块周围爬出,经有限稀释法挑选出克隆群落继续培养;流式细胞术检测结果表明:细胞阳性表达CD29、CD44、CD90和CD105,阴性表达CD34和CD45;免疫荧光法检测细胞阳性表达Nesting、Stro-1:经过成骨诱导、成脂诱导和成软骨诱导后有矿化结节、脂滴和软骨球形成,说明所培养的细胞具备多向分化能力。2.CCK-8法检测细胞增殖能力,并且绘制生长曲线;EdU标记增殖细胞,结果表明:低功率激光照射后36-60h,1J/cm2组对牙周膜干细胞的增殖具有促进作用,2J/cm2组对牙周膜干细胞的增殖有抑制作用;3.qRT-PCR结果显示:低功率激光照射后72h,lJ/cm2组的增殖相关基因PCNA和Ki67的表达下调,而2J/cm2组的PCNA和KI67的表达上调;4.在NM条件下,2J/cm2组能量密度上调了 PDLSCs成骨相关mRNA和蛋白的表达;而在OIM条件下2J/cm2组能量密度下调了 PDLSCs成骨相关mRNA和蛋白的表达。[结论]1.实验中培养的PDLSCs具有自我更新克隆能力,符合间充质干细胞表面标记特征,同时具备成骨、成脂以及成软骨的多向分化能力。证明所得到细胞为牙周膜干细胞。2.1J/cm2组的细胞在照射后36-60h,对细胞的增殖具有促进作用;2J/cm2组的细胞在照射后36-60h对PDLSCs的增殖具有抑制作用,而在LLLT照射后72h,对PDLSCs的增殖具有促进作用。3.在NM条件下,2J/cm2组能量密度对PDLSCs的成骨具有促进作用;OIM条件下2J/cm2组能量密度对PDLSCs的成骨不具有抑制作用。4.LLLT照射后DEGs集中在TGF-β信号通路上,提示该通路可能与PDLSCs增殖、成骨向分化的调控有关。
其他文献
[目的]探讨连续性血液净化治疗重症急性胰腺炎合并多器官功能障碍综合征的治疗效果及临床特点。[方法]采用回顾性研究方法,纳入昆明医科大学第一附属医院（2015年12月1日-2020年11月31日）5年间确诊为SAP合并MODS的住院患者100例。根据是否进行了连续性血液净化治疗分为CBP组（43例）及对照组（57例）,CBP组根据结局分为CBP死亡组（14例）和CBP生存组（29例）,收集患者一般资
[目的]探讨富血小板血浆（platelet rich plasma,PRP）精准注射治疗部分肩袖撕裂患者的临床疗效和安全性。[方法]选取2019年11月至2020年11月收住在昆明医科大学附属延安医院疼痛科的30例诊断为部分肩袖撕裂的患者。所有患者均行PRP注射治疗,均在超声引导下注射至损伤部位,总共注射1次,每侧注射5ml。随访观察8周,记录患者注射治疗前以及治疗后1周、4周、8周的情况,分别评
[目的]针对目前临床肺癌基因突变检测费用高、耗时相对较长、病理取材相对困难等因素导致的基因检测送检率低的问题,本文探讨非小细胞肺癌患者免疫组化指标TTF-1、NapsinA、CK7、P63、P40的表达以及临床病理特征、胸部CT影像特征、肿瘤标记物表达水平与EGFR突变的相关性,为预测EGFR突变状态提供依据,为肺癌患者制定更好的治疗方案。[方法]根据纳入及排除标准,选取2019年11月至2021
[目的]肺癌死亡率在所有确诊恶性肿瘤中一直均位居首位,其中肺鳞状细胞癌（squamous cell lung carcinoma,SqCLC）的临床治疗面临巨大挑战。因此,在肺鳞癌中寻找更特异的分子靶标或生物标记物（biomarker）具有重大的理论和临床意义。血小板衍生生长因子受体（Platelet-derived growth factor receptors,PDGFR）包括PDGFR-α和
[目 的]分析及比较髋关节置换术与内固定术这两种手术方式治疗高龄不稳定股骨粗隆间骨折的临床疗效,为临床治疗的选择提供指导。[方法]对纳入研究的120例患者进行回顾性分析。根据选用的手术方式分为置换组或内固定组,对患者进行分组编号,记录两组患者术前、围手术期、随访情况及影像学资料进行分析,从而比较两种手术的临床疗效。[结 果]1.一般资料:两组术前各项资料的比较差异均无统计学意义（P>0.05）。2
[目的]非酒精性脂肪性肝病（Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）已被认为是世界上慢性肝病的最主要原因,目前尚无特效治疗药物,临床负担日益加重。幽门螺杆菌（H.pylori）感染与NAFLD的发生发展的关系已经被广泛报道,但尚存争议。探讨H.pylori感染是否会加重NAFLD的严重程度和血糖、血脂、血压等代谢指标,并评估合并H.pylori感染的NAFL
[目的]以首次因乳腺问题入院的Ⅰ～Ⅲa期乳腺癌患者为研究对象,调查其入院时焦虑、抑郁情绪,细化探究乳腺癌患者的心理状况及相关影响因素,深入了解乳腺癌患者心理健康情况,探讨和分析患者焦虑、抑郁情绪及其相关影响因素,寻找调节患者焦虑及抑郁的切入点,并提出相应的对策与建议,为减轻患者负面情绪提供数据支持与现实依据,提高患者生活质量,促进患者康复。[方法]采用医院焦虑抑郁自评量表（HADS）中文版作为调查
[目 的]通过十二导联心电图计算急性心肌梗死（Acute myocardial infarction,AMI）患者 Selvester QRS 评分（Selvester QRS score,SQs）,探讨 SQs与AMI患者冠状动脉病变程度及左室功能的关系。[方 法]选取2018年1月至2020年4月在昆明医科大学第二附属医院心内科首次因胸闷、胸痛确诊为AMI行经皮冠状动脉内介入（Percutan
[目 的]初步探讨荧光腹腔镜与普通腹腔镜在结直肠癌根治术中的临床疗效差异,阐述荧光腹腔镜结直肠癌根治术在临床中的适用性。[方法]根据研究对象的纳入标准及排除标准收集2019年7月至2021年1月就诊于昆明医科大学第二附属医院胃肠外科二病区的结直肠癌患者,分为普通腹腔镜结直肠癌根治组与荧光腹腔镜结直肠癌根治组,将两组患者的性别、年龄、体重指数、肿瘤位置等方面进行病例匹配,共收集60例病例进行研究,其
[目 的]研究在不同急性加重频率的慢性阻塞性肺疾病患者中FENO、外周血EOS%在评估疾病急性加重程度之间相关性,探究FENO、外周血EOS是否能指导全身静脉激素使用以及其可靠性和有效性,从而为急性加重的慢性阻塞性肺疾病患者提供更为合理的治疗方案,减少急性加重的频率、改善患者生活质量及减轻疾患家庭、社会负担。[方 法]对2018年10月至2020年12月昆明医科大学第一附属医院呼吸与危重症医学二科