中国蜂胶对糖尿病大鼠早期糖尿病视网膜病的作用及其机制

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近年来,糖尿病已经发展成为危害人类健康、社会和经济发展的全球性问题,世界卫生组织发布的报道显示,2014年全球糖尿病患者人数已增加到4.22亿。糖尿病视网膜病是糖尿病引起的最严重的并发症之一,也是导致成人视觉障碍和失明的主要原因。据估计,糖尿病患者中,糖尿病视网膜病的全球患病率为34.6%。在糖尿病视网膜病的治疗中,对于增殖性糖尿病视网膜病和黄斑水肿可以通过注射抗血管内皮生长因子来达到治疗的效果。然而对于早期糖尿病视网膜病,临床上仍缺乏相应的预防和治疗措施。
  蜂胶是蜜蜂采集植物树脂并混入蜂蜡与上颚腺分泌物加工而成的一种胶状物质。其具有多种药理活性,如抗菌、抗炎、抗氧化和心血管保护作用等,是一种被广泛认可的功能性食品。前人的研究表明,蜂胶可以调节糖尿病模型动物的血糖、改善伤口愈合、保护肝肾功能,说明其在糖尿病治疗中有着潜在的应用价值。然而目前还缺少蜂胶对糖尿病视网膜病的相关研究。
  基于以上背景,在本研究中,我们探究了中国蜂胶对链脲霉素诱导的糖尿病大鼠早期视网膜病的作用效果,并进一步研究了中国蜂胶对糖尿病视网膜病中血视网膜屏障的作用。主要的研究内容与结果如下:
  1.首先对中国蜂胶进行乙醇提取物的制备与成分分析,结果表明本研究所用的中国蜂胶乙醇提取物中含量最高的6种单体分别为白杨素、高良姜素、松属素、3-O-乙酰短叶松素、短叶松素和咖啡酸苯乙酯。其次研究了中国蜂胶乙醇提取物对糖尿病大鼠体征的影响。实验结果显示,中国蜂胶能够显著降低糖尿病大鼠血糖、糖化血红蛋白的水平;同时,中国蜂胶能够显著抑制氧化应激,降低血清中丙二醛、活性氧簇和活性氮簇的含量;另外,在保护肾脏方面,中国蜂胶能够明显降低尿糖、血尿素氮、尿总蛋白和尿微量白蛋白含量。
  2.通过冰冻切片HE染色方法,检测各组大鼠视网膜结构与厚度,并利用透射电子显微镜技术,进一步观察各组大鼠视网膜中感光细胞的状态。结果发现,中国蜂胶能够显著抑制糖尿病大鼠视网膜增厚,并在一定程度上保护视网膜感光细胞,抑制糖尿病所引起的感光细胞凋亡。
  3.利用伊文氏蓝灌注、免疫荧光定位和定量相结合的方法,研究视网膜中出现血管渗漏的位置与程度。通过透射电子显微镜、免疫荧光标记occludin和ZO-1蛋白,进一步探究中国蜂胶保护糖尿病大鼠血视网膜屏障的作用机制。结果发现,中国蜂胶能够有效地抑制血管渗漏和紧密连接复合体的丢失,上调occludin和ZO-1蛋白的表达。
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