[研究背景]帕金森病（Parkinson’s disease,PD）是世界第二大常见的神经退行性疾病。小胶质细胞介导的神经炎症和线粒体功能障碍在PD的发病过程中起着关键作用。线粒体自噬是指将受损或多余的线粒体递送至溶酶体,随后被降解回收,对调控线粒体质量和维持线粒体正常功能必不可少。线粒体自噬与多种神经退行性疾病密切相关,例如PD、亨廷顿病、阿尔茨海默病等。尿石素A（UrolithinA,UA）是一种天然化合物,由肠道细菌从含有鞣花单宁和鞣花酸的食物（如石榴、浆果和坚果等）中产生,具有抗炎、抗凋亡、抗氧化、抗肿瘤等作用;更重要的是,UA可以促进线粒体自噬。然而,UA在PD中的潜在功能及机制尚不清楚,尤其是UA是否可以促进小胶质细胞线粒体自噬。基于以上研究背景,本实验将重点关注UA在PD中发挥的具体作用,探讨其是否通过促进小胶质细胞线粒体自噬来保护线粒体功能以及抑制神经炎症,最终保护多巴胺能神经元。[研究方法]1.小鼠连续7天腹腔注射UA后通过腹腔注射MPTP诱导急性PD模型,转棒、爬杆和悬挂实验评估小鼠运动行为变化;免疫组化、尼氏染色和western blot评估多巴胺能神经元变性情况;western blot和免疫荧光检测自噬和神经炎症的变化。2.BV2小胶质细胞用UA及LPS处理后,real time RT-PCR、免疫荧光和western blot观察炎症反应和NLRP3炎症小体激活情况;western blot和免疫荧光观察自噬和线粒体自噬的变化;流式细胞仪、免疫荧光、Seahorse细胞外通量分析仪以及透射电镜评估线粒体功能。3.使用3-甲基腺嘌呤（3-Methyladenine,3-MA）阻断BV2小胶质细胞的线粒体自噬,real time RT-PCR、western blot和流式细胞仪检测细胞内炎症反应和线粒体功能的变化。4.使用小胶质细胞条件性Atg5基因敲除小鼠（Atg5 flox/flox;CX3CRl-Cre）阻断小胶质细胞线粒体自噬,通过免疫组化、尼氏染色和western blot评估多巴胺能神经元变性情况。[实验结果]1.在MPTP诱导的急性PD模型中,UA可减轻小鼠行为障碍和多巴胺能神经元变性,促进自噬并抑制神经炎症。2.UA可抑制LPS诱导的BV2小胶质细胞中炎症反应和NLRP3炎症小体的激活,改善自噬和线粒体自噬障碍,保护线粒体功能,包括线粒体膜电位、ROS、线粒体形态和线粒体代谢等。3.阻断线粒体自噬可逆转UA对LPS诱导的BV2小胶质细胞中炎症反应和线粒体功能的保护作用。4.Atg5 flox/flox;CX3CR1-Cre线粒体自噬缺陷小鼠中,UA对多巴胺能神经元的保护作用被部分阻断。[结论]UA在体内可减少PD模型小鼠的多巴胺能神经元损失,改善小鼠运动障碍和神经炎症;在体外可促进线粒体自噬,保护功能失调的线粒体以及抑制炎症反应,并且UA的保护作用依赖于线粒体自噬。