青岛文昌鱼SAHH基因的鉴定、表达及进化分析

来源 :山东理工大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:gengkc
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文从青岛文昌鱼(Branchiostomabelcheri tsingtaunese)肠cDNA文库中,克隆了具有完整编码框的SAHH基因(AmphiSAHH),并对其结构、表达、进化及蛋白特性展开了研究。 青岛文昌鱼SAHH基因包括一个1305bp的最大开放阅读框,编码434个氨基酸,推测其分子量为47.8kDa。同源分析比对发现,文昌鱼SAHH蛋白与其它物种SAHH蛋白的相似性高达67.3%-82.1%。在所建的进化树中,文昌鱼SAHH蛋白位于脊椎动物分枝的基部,脊椎动物和无脊椎动物各自聚群,支持了文昌鱼是脊椎动物起源的观点,也进一步证明AmphiSAHH是脊椎动物和无脊椎动物SAHH蛋白的同源物。原位杂交分析表明,AmphiSAHH在文昌鱼原肠胚内胚层开始表达,在神经胚及幼虫时期信号也在肠部出现,推测SAHH基因对文昌鱼发育过程中肠的形成有重要的作用。AmphiSAHH基因组DNA序列分析发现其具有八个外显子和七个内含子,分析各物种SAHH基因组DNA序列发现,海鞘(九个外显子与八个内含子)与脊椎动物(十个外显子和九个内含子)似乎有更近的亲源性。本文还利用实时定量技术检测了Ado对文昌鱼SAHH基因表达的影响。 原核表达并纯化了文昌鱼His-SAHH重组蛋白,获得分子量约为48kDa的纯化蛋白。利用分光光度法和HPLC法检测重组蛋白的酶活及其与NAD<+>/NADH的结合系数。使用成品SAHH多克隆抗体进行Western杂交及免疫组化实验,结果表明,抗体能与我们的重组蛋白特异性杂交,SAHH蛋白主要分布在文昌鱼精巢、卵巢、肝盲囊及鳃裂。
其他文献
  针对目前军队研究生培养现状,本文通过合理分析影响因素、科学构建评估体系、系统评估课程效果,实证分析验证了算法的可行性和有效性,其结果为军队研究生教育实践课程效果评
  本文在简要分析当前军队研究生课程设计、教学和管理中存在不足的基础上,从加强正确导向、规范培养方式、改进教学模式、突出创新能力培养等四个方面,对提高军队研究生教育
  学科专业建设对于军队院校充分利用有限教育资源,提升自身教育、科研水平具有十分重要的意义。本文在分析当前军队院校学科专业建设中存在问题的基础上,提出了各院校要塑造
  研究生培养模式是研究生教育理念的重要体现,是对研究生培养的一种设计和安排。我院的国防经济学科点作为国家重点学科,为适应研究生教育转型的需要,在研究生的培养上,要以"
  本文依据案例教学法的一般规律和实际教学经验,以军事专业学位(军事装备领域)《军品审价技术与方法》课程教学中的一起审价案例教学为实证,探索在军事专业学位研究生教学中
  后勤院校研究生队建设是军事院校建设重要一环,它的工作效率、效果直接影响到后勤院校的整体建设水平。在当前全军推进"依法治军、从严治军"的背景下,如何加强后勤院校研究
  针对跨学科研究生培养所面临的诸多问题,通过构建跨学科研究生个性化课程体系、建立首席导师负责制的多学科多导师联合培养制度、优化跨学科研究生培养资源配置和组织跨学
  本文着眼培养"能打胜仗"新型后勤指挥人才,加强后勤指挥专业研究生教育,提出必须强化"十种意识",着力抓好教育理念更新,突出抓好教育内容设置,大力抓好综合素质培养,确保教育效
  数字化校园建设将为高层次高学历人才培养提供先进高效的技术平台,也为研究生教育改革注入新的活力。本文着眼于新时期数字化校园建设,主要从研究生教育的教学方式、考评办
  本文运用SWOT分析法,剖析了"小班化"案例教学的优势与劣势,探讨了"小班化"案例教学所面临的机遇与挑战,并提出了相应的对策措施,以期更好地开展"小班化"案例教学。