目的：研究利用RNA干扰技术(RNAi),抑制葡萄糖调节蛋白Grp94的表达对卵巢癌细胞体外、体内的治疗作用及其对化疗药物敏感性的影响。初步探讨RNA干扰技术抑制Grp94的表达作为卵巢癌基因治疗的可行性及方法。 方法：采用脂质体转染法将含有特异性小分子干扰Grp94 mRNA的重组载体psiSTRIKETM/Grp94导入卵巢癌细胞系HO-8910中,分别在转染前、转染后24h、48h和72h通过RT-PCR、Western blot和免疫荧光技术检测Grp94 mRNA及蛋白水平的表达情况,用流式细胞仪检测细胞凋亡。四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞经梯度浓度顺铂、紫杉醇及阿霉素处理后的细胞存活率。将HO-8910细胞注入裸鼠皮下,成瘤后瘤内注射含有特异性小分子干扰Grp94mRNA的重组载体及脂质体的混合物,观察移植瘤的生长情况及化疗药物的治疗效果。将含有特异性小分子干扰Grp94 mRNA的重组载体及脂质体的混合物注入裸鼠体内,观察对卵巢癌移植瘤形成的预防作用。 结果：成功构建RNA干扰质粒载体,靶向Grp94 RNA干扰质粒载体命名为psiSTRIKETM/Grp94。将上述质粒转染到卵巢癌细胞后,观察到psiSTRIKETM/Grp94能够有效的抑制Grp94 mRNA及蛋白表达。转染psiSTRIKETM/Grp94基因后的卵巢癌细胞增殖受到抑制,出现凋亡征象,且对化疗药物的敏感性增加。转染psiSTRIKETM/Grp94基因后的卵巢癌细胞裸鼠移植瘤的生长受到抑制,出现凋亡征象；注射携带psiSTRIKETM/Grp94基因的重组质粒和脂质体对卵巢癌细胞裸鼠移植瘤的形成有一定的预防作用。化疗药物对转染psiSTRIKETM/Grp94基因的卵巢癌细胞裸鼠移植瘤的增殖抑制效果明显增加。 结论：构建的RNA干扰真核表达载体psiSTRIKETM/Grp94能明显抑制Grp94 mRNA及蛋白的表达,增加卵巢癌细胞的化疗敏感性。RNAi为卵巢癌的基因治疗提供了一种新策略。