论文部分内容阅读
10-HDA（10-羟基-2-癸烯酸）是蜂王浆中的主要活性物质，属于不饱和脂肪酸，在常温下为白色或淡黄色的针状晶体，在水中难以溶解，在丙酮中微溶，在甲醇、乙醇、乙醚等溶剂中容易溶解。10-HDA具有多种生理活性，不仅能够增强机体的免疫功能，对免疫力低下有一定的防治作用，而且在抗肿瘤、抗癌、抗辐射、抗菌、抗炎、抗溃疡方面有显著疗效。另外10-HDA还具有抑制脂肪合成和降低血脂作用的作用。首先本论文研究了10-HDA的抑菌活性，对实验室常见的4株细菌和2株酵母菌进行了10-HDA的抑菌圈检测，然后通过2倍稀释的方法，进而确定10-HDA对细菌的最小抑菌浓度（MIC）。实验结果表明，10-HDA对细菌都有一定程度的抑制作用，其中对革兰氏阴性菌的抑制效果明显，对酵母几乎没有作用；不同的菌种，10-HDA的MIC也不同，对大肠杆菌的MIC为0.25mg/mL。由于10-HDA对大肠杆菌的抑制效果最为明显，因此采用大肠杆菌为模式菌株来研究10-HDA的抑菌机理。然后本论文利用原子力显微镜对10-HDA处理过的大肠杆菌的形态进行了观察，通过比较对照组发现，10-HDA破坏了大肠杆菌的细胞完整性。通过对10-HDA处理过的大肠杆菌的生长曲线、细胞壁、细胞膜、无机离子、蛋白质、呼吸链脱氢酶等的变化进行分析，结果显示，10-HDA作用后，大肠杆菌的细胞壁、细胞膜的通透性增大；蛋白质表达发生变化、呼吸链脱氢酶失活。从实验得到的结果推断10-HDA对大肠杆菌的抑制机理为：10-HDA加入大肠杆菌菌液之后，部分解离成[HOCH2（CH-2）8COO]和[H+]，[HOCH2（CH2）8COO-]竞争吸附大肠杆菌表面的正电荷离子，造成脂多糖暴露，未解离的10-HDA进入细胞周质空间与外膜的磷脂分子和脂多糖相互作用，造成细胞壁通透性增大；另外，10-HDA参与细胞膜磷脂的形成，使细胞膜流动性增大，造成膜上的蛋白移位，使呼吸链受损，通道蛋白受损，膜电位降低，ATP合成减少，通透性增大，无机离子及小分子物质渗出。同时，10-HDA进入胞质，扰乱胞内阴离子平衡，胞内渗透压增大，导致细胞死亡。