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目的:研究九节龙皂苷Ⅰ(ardipusilloside I,ADS I)对口腔粘液表皮样癌高转移细胞株Mc3的增殖、凋亡及细胞周期的影响,初步探讨ADS I可能的抗肿瘤作用机制方法:以不同浓度的ADS I作用于口腔粘液表皮样癌Mc3细胞,采用MTT法观察ADS I对口腔粘液表皮样癌Mc3细胞增殖的影响;采用Hoechest 33342染色法和透射电镜(TEM)观察细胞形态学的变化;采用AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡情况;采用流式细胞术PI单色标记法检测Mc3细胞周期的改变;采用DNA琼脂糖凝胶电泳法检测凋亡特异性梯状DNA;采用免疫组化法检测抗凋亡蛋白Bcl-2及促凋亡蛋白caspase-3表达的变化。结果:ADS I作用于Mc3细胞后,小剂量对细胞杀伤作用较轻,随着药物浓度的增加, ADS I能显著抑制Mc3细胞增殖而且呈明显的浓度、时间依赖关系,作用于Mc3细胞48h的IC50值为9.98ug/ml。Hoechest 33342染色法和透射电镜观察到细胞形态学上的变化,包括细胞皱缩,微绒毛消失,染色质固缩集聚至核膜周边呈新月形。流式细胞仪检测未经药物作用的细胞凋亡率为11.63±0.16%,2.5、5、10ug/ml ADS I作用24后的凋亡率为15.57±0.07%,25.63±0.18%,86.27±0.04%;细胞周期阻滞在S期;琼脂糖凝胶电泳结果显示,10ug/ml ADS I作用于Mc3细胞24后,可见凋亡细胞典型的梯状DNA条带,Western blotting结果显示,caspase-3和Bax蛋白表达量增高,Bcl-2蛋白表达量降低。结论:1. ADS I具有抑制口腔粘液表皮癌细胞增殖,阻滞细胞周期进程的作用,其抑制作用呈浓度时间依赖性。2. ADS I有诱导Mc3细胞凋亡作用。3. ADS I诱导细胞凋亡作用可能是通过引起细胞DNA受损,上调caspase-3和Bax蛋白表达和下调Bcl-2蛋白表达而达到的。