【摘 要】
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目的:比较溶剂萃取、溶剂蒸发和共溶剂法三种方法制作载胰岛素聚乳酸羟基乙酸（Poly lactic-co-glycolic acid,PLGA）微球差异,观察其对骨髓间充质干细胞（bone marrow stem cell,BMSCs）成骨分化及种植体周围骨再生的影响。方法:通过溶剂萃取（EMS）、溶剂蒸发（SMS）和共溶剂法（CMS）,制备三种粒径分布相似的PLGA微球。考察制备方法对微球性能的影
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目的:比较溶剂萃取、溶剂蒸发和共溶剂法三种方法制作载胰岛素聚乳酸羟基乙酸（Poly lactic-co-glycolic acid,PLGA）微球差异,观察其对骨髓间充质干细胞（bone marrow stem cell,BMSCs）成骨分化及种植体周围骨再生的影响。方法:通过溶剂萃取（EMS）、溶剂蒸发（SMS）和共溶剂法（CMS）,制备三种粒径分布相似的PLGA微球。考察制备方法对微球性能的影响,包括微球的释放行为、分子量的降解和结构演变。采用人骨髓间充质干细胞（BMSCs）检测微球的体外生物活性。结果:采用溶剂萃取、溶剂蒸发和共溶剂法均成功得制备了粒径分布均一的负载胰岛素PLGA微球。所有微球均为球形,表面光滑,EMS、SMS和CMS微球的粒径分别为22.87±0.21μm、22.69±0.25μm和22.57±0.31μm。跨距小于0.7,粒径分布较窄。载药量平均都在3%-4%之间。EMS呈现最高的初始爆发,随后是低药物释放期,释放率在第三周增加。SMS呈现出的是较低的初始释放和较长时间的释放曲线。CMS微球表现出与EMS微球相似的释放行为,但表现出最低的初始破裂。EMS、SMS和CMS微球表现出相似的Mw降解曲线。随着时间的往后推移,三种聚合物的分子量呈现线性下降。在14天的细胞培养过程中,四组的细胞数量都呈现出增加趋势。与空白组和CMS组相比,EMS组和SMS组的细胞数在3d后是显著增加的。在第7天和第14天,SMS组的细胞增殖明显高于其他组。EMS组细胞增殖明显高于CMS组和空白组。空白组与CMS组之间无显著性差异。与其他组相比,第3天和第14天,EMS和SMS组的ALP浓度显著升高。在第7天,SMS组的ALP浓度显著高于其他组;EMS组的ALP浓度显著高于CMS组和空白组。在第3天和第7天,不同组间OCN表达没有显著差异。第14天,SMS和CMS组OCN表达水平显著高于其他组。在第21天,用茜素红染色提示SMS组的钙积累显著高于其他组。空白组、EMS组和CMS组之间无显著性差异。结论:在本实验中,与EMS和CMS微球相比,载胰岛素的SMS微球在前4周释放率相对稳定,可明显促进干细胞的成骨分化,进而促进体外成骨。
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