【摘 要】
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LC-MS技术是目前测定微量成分含量最常用的技术之一,具有分析速度快、高灵敏度、高准确度等优点,因此常用于快速定性、定量分析。该技术在研究药物成分在体内的药代动力学具有显著的优点。玉竹为百合科植物玉竹的干燥根茎,为药食两用传统中药,具有降血糖、降血脂及抗肿瘤等作用,广泛用于药品、保健食品及化妆品等行业。玉竹的化学成分主要包括多糖类、皂苷类、黄酮类及氨基酸等。玉竹醇提物具有较好的药理活性,富含20余
【基金项目】
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黑龙江省自然科学基金项目（项目编号:LH2019H127）；
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LC-MS技术是目前测定微量成分含量最常用的技术之一,具有分析速度快、高灵敏度、高准确度等优点,因此常用于快速定性、定量分析。该技术在研究药物成分在体内的药代动力学具有显著的优点。玉竹为百合科植物玉竹的干燥根茎,为药食两用传统中药,具有降血糖、降血脂及抗肿瘤等作用,广泛用于药品、保健食品及化妆品等行业。玉竹的化学成分主要包括多糖类、皂苷类、黄酮类及氨基酸等。玉竹醇提物具有较好的药理活性,富含20余种高异黄烷酮成分。本实验将10 kg玉竹药材用80%乙醇回流提取,水沉、离心后得浸膏,将浸膏用硅胶柱层析色谱、制备液相色谱、制备薄层色谱等技术分离纯化,制得四个含量较高的成分,利用质谱、核磁等波谱解析方法鉴定这四个化合物的结构,测试红外光谱、首次采集其显微拉曼光谱,讨论这四种高异黄烷酮在红外、拉曼光谱上的差异。查阅文献发现,这四种高异黄烷酮（Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ）具有较强的抑菌、降糖、抗癌活性,但未见有报道其在体内的药代动力学研究。本实验首次建立同时测定玉竹中四种高异黄烷酮血药浓度的液质联用（UPLC-MS/MS）方法,并将该方法应用于大鼠体内血药浓度的测定。1.成功从玉竹中分离出四种高异黄烷酮化合物,鉴定其名称分别为:6-甲基-8,4?-二甲氧基-5,7-二羟基-高异黄烷酮（Ⅰ）（13.52 mg）、6,8二甲基-5,7,4?-三羟基-高异黄烷酮（Ⅲ）（63.83 mg）、6-甲基-8-甲氧基-5,7,4?-三羟基-高异黄烷酮（Ⅳ）（105.95mg）、6-甲基-5,7,4?-三羟基-高异黄烷酮（Ⅴ）（13.52 mg）。2.建立该四种高异黄烷酮血药浓度UPLC-MS/MS方法,流动相为0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈,四种成分和内标在8 min内完全分离。考察了所建方法的色谱、质谱条件,继而对该方法的专属性、线性、精密度、准确度、提取回收率以及基质效应、稳定性进行考察,发现高异黄烷酮Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅰ的线性范围分别是0.2～32,0.2～26,0.0875～14,0.0875～14 ng/m L,相关系数r均大于0.9990,定量下限分别为0.2,0.2,0.0875,0.0875 ng/m L;总日内与日间精密度RSD分别为1.91%～6.23%,3.95%～6.23%;提取回收率均大于90%,基质效应和稳定性均符合生物样品分析要求,为这四种高异黄烷酮的药代动力学研究提供基础。3.用所建UPLC-MS/MS方法,对灌胃高异黄烷酮Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅰ混合液的SD大鼠血浆样品进行检测,建立血药浓度-时间曲线,获得体内高异黄烷酮Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅰ的Cmax、Tmax、T1/2z、AUC（0-t）、CLz/F、Vz/F等参数,发现该方法适用于这四种高异黄烷酮的大鼠体内药代动力学研究。
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