禽巴氏杆菌病又称禽霍乱,是由多杀性巴氏杆菌引起禽类的一种急性、败血性传染病。可以感染所有禽类且多为致死性感染。16周龄以上禽类易感性更高,成年火鸡最为易感,发病最为严重。该病广泛流行于世界各地,是危害养禽业重要的细菌性传染病之一,健康携带病原或感染的禽类均是重要的传染源。急性禽霍乱可导致家禽和野生禽类急性、出血性败血症,发病急、致死率高,给养禽业造成了巨大的经济损失。2014年8月,长春某观赏动物园区5只火鸡先后发病死亡,其中2只于夜间死亡,其余3只清晨可见精神沉郁、羽毛松乱、食欲丧失,体温升高(43.5℃),排绿色稀粪,呼吸显局促等临床表现。临床剖检发现肝脏肿大、表面灰白色针尖状坏死点,心外膜有点状出血,十二指肠卡他性、出血性炎症,根据临床症状和病理变化,初步疑似诊断为火鸡禽霍乱。为了进一步证实,本研究利用病理组织学检查、细菌学检查、动物回归试验和PCR等方法从病理学和病原学角度对该病的发生原因、病原特点进行了系统的深入研究。具体研究内容如下:1火鸡禽霍乱病理学诊断对死亡火鸡进行病料采集、固定,制作病理切片观察。心脏可见心肌纤维断裂、崩解,部分胞核消失,心肌纤维明间隙有红细胞存在,间质中可见炎性细胞浸润;肝脏静脉淤血扩张,管腔与窦内充有大量红细胞,部分肝细胞坏死,胞核溶解、空泡化;间质中存在白细胞浸润;小肠粘膜固有层明显充血、出血,绒毛间质内有红细胞和白细胞浸润,肠绒毛细胞脱落,呈卡他性出血性肠炎;肺脏充血明显,间隔增宽,内有多量红细胞和白细胞。2多杀性巴氏杆菌的分离、鉴定取死亡火鸡心血和肝脏病料,通过TSA琼脂培养基进行病原分离培养,对分离菌株进行染色鉴定、生化鉴定、微生物鉴定系统鉴定和动物回归试验。可见分离菌株革兰氏染色为红色短小杆菌,美兰染色为两极浓染,生化试验结果符合多杀性巴氏杆菌的生化特点,微生物鉴定系统鉴定结果显示该分离菌株脂肪酸含量与多杀性巴氏杆菌最为接近,通过雏鸡动物回归试验可见分离菌株的LD50为22 CFU。进一步提取菌株的基因组DNA进行Kmt鉴定和16s rRNA鉴定,结果显示扩增出了Kmt基因,比对分析与多杀性巴氏杆菌ATCC 43137的同源性也高达99%,16s rRNA测序后经比对分析与C48-11等几种禽源多杀性巴氏杆菌的同源性均在98%以上,从分子水平证明分离菌株为多杀性巴氏杆菌。利用PCR方法对分离菌株进行荚膜和脂多糖血清分型,荚膜分型显示该分离株为A型多杀性巴氏杆菌,脂多糖PCR分型将分离株确定为L3型,由此可见分离的多杀性巴氏杆菌血清型为3:A或4:A,是我国禽霍乱主要流行的血清型。通过药敏试验进行敏感药物筛选,结果表明分株菌株对头孢噻肟钠、头孢曲松、氨曲南、吡哌酸有非常高的敏感性,选取头孢噻肟和头孢曲松进行注射,并结合严格的消毒,控制了该病的再次发生和蔓延。