腺病毒介导的VEGF-165基因过表达对缺氧性肺动脉高压新生大鼠肺血管重塑的影响研究

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目的:通过观察缺氧性肺动脉高压(HPH)新生大鼠肺组织血管内皮生长因子(VEGF)和生存素的表达变化、右心室内收缩压(RVSP)及肺血管重塑情况,探讨过表达的VEGF对新生大鼠肺组织生存素表达水平的影响及其在HPH新生大鼠肺血管重塑中的作用。方法:将新生大鼠随机分为对照组、HPH组与VEGF+HPH组,每组再按观察时间点分为3天、7天、10天及14天组,VEGF+HPH组新生大鼠转染携VEGF-165基因与绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-VEGF-165-GFP),次日与HPH新生大鼠共同置于低氧舱内建立HPH模型,对照组大鼠则于空气氧浓度下饲养。各组新生大鼠在相应的观察时间点检测RVSP,通过免疫荧光观察腺病毒在肺组织中的转染情况,借助免疫组化技术评价肺组织VEGF及生存素的表达,于光镜下观察肺血管重塑情况并及计算肺血管重塑指标。结果:1)免疫荧光:VEGF+HPH组新生大鼠腺病毒转染后第3天时即可在肺组织中观察到较明显的绿色荧光,其强度随缺氧时间延长而逐渐衰减,至缺氧第14天时已几乎消失,提示腺病毒成功转染至新生大鼠肺组织;2)RVSP:与对照组相比,HPH组与VEGF+HPH组新生大鼠自缺氧第3天开始即有RVSP的升高,并随着缺氧时间延长而逐渐增高,其中HPH组最高,VEGF+HPH组次之,且两两比较,差异均具有统计学意义(P<0.05);3)VEGF的表达:HPH组随着缺氧时间的延长,VEGF表达逐渐增高,缺氧第7、10、14天,与对照组的差异均具有统计学意义(P<0.05),VEGF+HPH组新生大鼠的VEGF表达则随缺氧时间的延长而逐渐减低,缺氧第10、14天与HPH组的差异已无统计学意义(P>0.05),但始终大于对照组(P<0.05);4)生存素的表达:HPH组新生大鼠的生存素表达随缺氧时间的延长而逐渐增强,但至缺氧第14日,与对照组的差异才具有统计学意义(P<0.05),VEGF+HPH组生存素的表达则随着缺氧时间延长逐渐减低,至第10日时,与HPH组的差异已无统计学意义(P<0.05);5)肺血管重塑:HPH组自缺氧第7日即有明显肺血管重塑表现,MT%与MA%较对照组增高(P<0.05),并随缺氧时间的延长而逐渐加重,而VEGF+HPH组在缺氧第10才观察到较明显的肺血管重塑表现,MT%与MA%较对照组增高(P<0.05)。结论:腺病毒介导的VEGF-165在新生大鼠肺组织过表达后,可提高生存素的表达,降低HPH新生大鼠的肺动脉压力,延迟肺血管重塑的发生,推测可能与VEGF及其下游生存素的促细胞存活功能有关。
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