高寒地区油菜秸秆堆肥复合菌系的筛选研究

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青海省是我国油菜种植大省,油菜是青海省位居第一的经济油料作物,随着种植面积的逐年增长,油菜秸秆的产生量也逐年增加。堆肥化处理秸秆是农作物资源化有效措施之一。秸秆中含有纤维素,而纤维素在堆肥过程中较难降解。在油菜秸秆堆肥时,向其加入纤维素降解菌剂,利用微生物降解纤维素,是解决这一问题的有效措施之一。为了筛选出适用于青海地区油菜秸秆纤维素降解的菌株,本文从青海省不同样品类型中筛选出纤维素降解菌,通过菌株的酶活测定,单菌株堆肥试验、复合菌系堆肥试验,从而筛选出适合青海地区油菜秸秆堆肥的复合菌系,主要试验研究结果如下:(1)通过筛选共分离纯化97株菌株,其中细菌76株,真菌12株,放线菌9株。经过刚果红初筛实验、酶活测定复筛实验,筛选出6株纤维素能力较强的菌株。(2)建立单菌株堆肥试验,测定堆肥理化指标。其中T1、T2、T3处理的主成分分析值较高,T1、T2、T3堆体的高温持续时间分别29 d、25 d、17 d;p H在有机肥行业标准范围内;种子发芽指数分别为116%、96%、144%;堆肥结束时,T1(17.15)、T2(14.90)、T3(16.42)处理的C/N比对照组(20.02)低,说明堆肥腐熟效果较优,从而筛选出T1、T2、T3处理中的菌株K1、H36-7-4、AH-5-1进行复合菌系的构建。(3)拮抗试验表明,三株菌株没有拮抗作用。组合ABC处理的秸秆失重率表现最优为35.07%;秸秆发酵室内试验第30 d,纤维素降解率34.66%,半纤维素降解率16.31%。(4)通过添加复合菌剂ABC到猪粪与油菜秸秆堆肥发酵中,较对照组CK相比,ABC处理堆体温度较CK处理高温期延长1d,提前11d进入降温期,堆肥最高温度比对照组高1.4℃;ABC处理的p H、电导率(EC)值分别为8.04、1.32 m S/cm,较对照组低0.14、0.8 m S/cm;复合菌剂ABC处理组种子发芽指数在堆肥第16 d达到腐熟标准,堆肥结束时ABC处理的种子发芽指数为129.47%,而CK处理为88.53%;ABC处理的有机质降解率为40.28%,全氮、全磷、全钾的含量分别为2.06%、3.19%、1.63%;堆肥结束时,添加三株菌株的ABC处理纤维素降解率为14.45%,半纤维素降解率为39.28%。(5)通过形态学和分子生物学鉴定,K1、H36-7-4为耐盐芽孢杆菌(Bacillus hatolerans);纤维素降解菌AH-5-1为耐寒短杆菌(Brevibacterium frigoritolerans)。
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