【摘 要】
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植物固醇是生物膜的重要组分,也是固醇类激素生物合成的前体,并且固醇本身还具有信号分子的功能,对植物的正常发育具有十分重要的作用。 鲨烯合酶(SQS)是植物固醇合成途径中
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植物固醇是生物膜的重要组分,也是固醇类激素生物合成的前体,并且固醇本身还具有信号分子的功能,对植物的正常发育具有十分重要的作用。 鲨烯合酶(SQS)是植物固醇合成途径中的一个关键酶,在拟南芥中SQS1是其编码基因,另外还有一个与其同源性很高的基因SQS2,这两个基因串联排列在第四号染色体上。利用组织透明方法观察,发现sqs1/sqs1的纯合胚发育停滞在球形胚时期之前,并且还出现胚柄和胚体细胞异常分裂的现象,比例分别为42%和35%。本文通过观察DR5rev:GFP在sqs1/sqs1胚中的荧光表达,发现胚柄有很强的荧光表达,而野生型胚柄则没有。对sqs1/SQS1突变体花粉粒的研究,表明花粉管的伸长缺陷导致雄配子传递效率下降。 本实验室此前运用RNA干扰技术获得了SQS1 RNAi的转基因株系,出现了植株极度矮化、主枝不明显、分枝增多呈灌木丛状、叶片有坏死斑且皱缩、花序茎顶端黄化、花期延长、种子产量下降等表型。针对莲座叶出现了坏死斑的现象,进行氮蓝四唑染色,结果表明细胞坏死是由于活性氧(ROS)积累导致的。对黄化茎进行切片、染色以及扫描电镜观察,发现皮层细胞死亡并且茎表面蜡质减少。 对SQS2与EGFP融合蛋白的观察确定其亚细胞定位于内质网膜。基因回补实验表明拟南芥SQS2基因不能编码有活性的鲨烯合酶。 总之,在拟南芥中只有SQS1是有功能的沙溪合酶,并且是植物生长发育所必需的。
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