偶氮染料是一类含有偶氮键的复杂的芳香型化合物,目前被广泛应用于印染、生物染色、皮革、医药、造纸、食品和化妆品等一系列的行业中,占每年染料总产量的70%。偶氮染料在生产和使用的过程容易流失,在环境中滞留会对人和动物产生毒性和致突变性。由于偶氮染料特殊的化学结构,其在环境中比较稳定,很难用一般的物理或化学方法去除,并且费用较高。用微生物降解的方法处理偶氮染料废水,经济有效且环境友好。因此,研究偶氮染料脱色菌的性能和相关酶学特性对于开发偶氮染料废水的生物处理方法具有重要意义。本论文对偶氮染料脱色菌ZHT-7的脱色特性以及偶氮还原酶的活性和编码基因进行研究,以期为该菌株的应用提供科学依据。本文选用偶氮染料脱色菌株ZHT-7为研究对象,通过脱色曲线研究菌株对偶氮染料阳离子蓝的脱色特性及影响因素。采用超声波破碎法提取菌株ZHT-7的偶氮还原酶,比较不同条件下的提取效果,利用响应面法优化提取方案。通过研究NADH、p H和温度对偶氮还原酶活性测定值的影响,以控制良好的检测精密度为目标建立偶氮还原酶活性最佳定量检测体系。利用此检测体系,研究温度和金属离子对偶氮还原酶活性的影响。利用PCR和分子克隆技术,对菌株ZHT-7的偶氮还原酶基因进行核酸测序和比对分析。研究结果表明,菌株ZHT-7对偶氮染料阳离子蓝的脱色特性稳定存在,不能以阳离子蓝染料为唯一碳源。胞外代谢产物（EM）和脱色代谢产物（DM）会抑制菌株对阳离子蓝的脱色,只添加EM和DM也能对阳离子蓝进行脱色。10～300mg/L的Mg2+、0.1～1 mg/L的Cu2+及10～200 mg/L的Ca2+在整个脱色过程中对脱色具有促进作用。0.1～2 mg/L的Mn2+对脱色的抑制作用随着浓度的增加而增加。超声波破碎法中的操作参数对细胞释放蛋白量有重要影响,其中超声总时间产生的影响最大。多元回归拟合分析得到蛋白浓度与各参数的二次方程模型,经响应面法优化后超声波细胞破碎的最佳条件为:超声功率87 w,超声总时间17.5min,单次超声时间1.5 s。用优化后的条件进行超声波细胞破碎得到平均蛋白质浓度为31.47 mg/L。NADH终浓度2 mmol/L、p H=7和37℃条件下测定偶氮还原酶活性,具有最佳的精密度,相对标准偏差为3.76%。对于高效脱色菌株ZHT-7,其偶氮还原酶在细胞内外都有分布。菌株ZHT-7的偶氮还原酶活性在20～45℃温度范围内均保持较高活性。0.1～2 mg/L的Mn2+和Cu2+都对菌株ZHT-7的偶氮还原酶活性呈现抑制作用,且随Mn2+和Cu2+浓度的增大,抑制作用增大。对菌株ZHT-7的偶氮还原酶基因进行检测,发现苏云金芽孢杆菌ZHT-7菌株的偶氮还原酶基因位于其染色体上。对其偶氮还原酶基因进行测序分析,发现其与Gen Bank中已有的序列相比,一致性较高的序列均来自于芽孢杆菌属。