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自身免疫调节因子（autoimmune regulator,AIRE）除能够维持中枢耐受外,其在诱导外周耐受中也担任重要角色。已经报道AIRE在外周可以调控树突状细胞（dendritic cell,DC）上组织特异性抗原（tissue specific antigens,TSAs）的转录、DC的成熟状态及其抗原提呈能力;也可以调控T细胞的耐受与分化状态。DC作为抗原提呈细胞,能够通过各种分子介导不同类型T细胞的分化,并促进其启动免疫应答或诱导耐受。T细胞亚群中Th17和调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）可分别介导促炎和抗炎作用,二者的分化存在一个平衡状态,且受多种因素影响,这种状态一旦失衡即导致自身免疫病、肿瘤等多种疾病。课题组前期研究发现,移植AIRE过表达的骨髓DC（BMDC）能够影响自身免疫糖尿病（NOD）小鼠脾脏T细胞亚群的变化,包括对Th17分化的抑制及对Treg分化的促进作用。因此我们设想,AIRE是否通过调控DC上的分子进而影响Th17/Treg细胞的分化。本文采用AIRE敲除鼠来源的BMDC(AIRE-/--BMDC),以AIRE-/--BMDC与T细胞共培养体系为模型,研究了AIRE-/--BMDC对Th17/Treg平衡的影响及机制:1.观察AIRE在DC对Th17/Treg分化的影响。首先为了观察AIRE对Th17/Treg细胞分化的影响,我们将LPS刺激后的AIRE-/--BMDC与WT-BMDC分别与T细胞共培养,采用RT-qPCR和FACS检测Th17和Treg的分化情况。结果显示,AIRE-/--BMDC组中Th17细胞的分化程度明显高于WT-BMDC组;Th17/Treg分化平衡偏向Th17细胞。提示,AIRE能够抑制Th17的分化,影响Th17/Treg分化偏向Treg。2.检测AIRE对DC中Th17/Treg分化相关分子的影响及作用。为进一步探究AIRE能否影响DC上与Th17、Treg分化相关分子的表达,我们采用RT-qPCR和ELISA进行检测。结果显示,AIRE-/--BMDC中,与Treg分化相关的IDO1和Aldh1α2仅mRNA表达水平低于对照组,与Th17分化相关的IL-23表达升高。采用anti-IL-23抗体阻断共培养过程中的IL-23,结果发现,Th17细胞的分化比例降低。说明AIRE可能通过下调BMDC释放IL-23,来抑制Th17分化,使Th17/Treg平衡向Treg倾斜。3.探讨AIRE调控DC中相关分子表达的分子机制。通过检测调控IL-23转录的NF-κB通路的相关分子表达。结果显示,AIRE-/--BMDC组p-IκBα和p-p65的表达量较对照组高,提示AIRE可能抑制NF-κB通路的激活状态进而下调IL-23的转录与表达。本研究表明,AIRE可通过调控DC上IL-23的表达,进而影响Th17/Treg的分化情况,为了解AIRE突变导致的自身免疫病提供了新的理论依据,并为治疗Th17/Treg相关疾病尤其是自身免疫病提供新的切入点。