目的：建立长效干扰素α-2b融合蛋白的蛋白表达、纯化方法及对其药代进行初步研究　　 方法：获得工程细胞株：干扰素α-2b融合蛋白的质粒用PvuⅠ酶线性化后，采用200 V电转导入真核CHO细胞中，用1.5 mg/ml G418加压筛选，用兔抗人IFN抗体作为一抗，偶联有辣根过氧化物酶的羊抗兔IgG抗体作为二抗，进行Dot Blot检测阳性表达，通过三次单克隆筛选获得稳定表达长效干扰素α-2b融合蛋白的细胞株；工程细胞培养：干扰素a-2b的三次克隆在T25方瓶中放大，并在T25方瓶中进行悬浮驯化，然后依次到T75、150 ml、1 L、5 L反应器进行扩增培养，种子链扩增过程中培养温度控制在37℃±0.5℃，每天取细胞培养物1 ml监测细胞密度、活率，显微镜下观察细胞大小形态，有无微生物污染。细胞密度控制在2～8×106cells/ml范围内，细胞活率要求大于90％。蛋白纯化工艺研究：利用蓝胶染料亲和层析对目的蛋白进行捕获，用阳离子交换层析进行中间纯化去除绝大部分杂质，用阴离子交换层析进行精细纯化，对各个层析过程中的层析参数(pH、洗脱盐浓度、动态载量、最大上样量)进行优化，经蓝胶染料亲和层析、阳离子交换层析、阴离子交换层析三步层析获得SDS-PAGE分析为单一条带的目的蛋白；初步药物代谢学研究：以小鼠为实验对象，用普通干扰素α-2b作为对照品，给药方式为皮下注射，给药体积为0.5 ml/只，剂量组为1000μg/kg和250 ug/kg两组。取血方式为眼眶取血，间隔时间为0.5 h、1 h、3 h、6 h、10 h、24 h、50 h、75 h、100 h、130 h，用建立好的双抗体夹心Elisa方法(10 ng～3μg/ml)检测长效IFN及普通IFN含量，绘制曲线观察药物代谢情况并判定结果。　　 结果：经蓝胶染料亲和层析、阳离子交换层析、阴离子交换层析三步层析纯化后获得纯度高达98％以上的长效干扰素α-2b蛋白，药物代谢学初步证明长效干扰素α-2b的半衰期为普通干扰素α-2b的3～6倍，具有长效性。　　 结论：成功地建立了长效干扰素α-2b融合蛋白的纯化方法；长效干扰素α-2b融合蛋白具有比普通干扰素更长的半衰期，长效干扰素α-2b融合蛋白具有长效性。