中华绒螯蟹不同MSTN基因型的生长特性与肌肉组织学观察

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中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)俗称河蟹、大闸蟹,主要产自于我国东部沿海地区。其生长较快,肉质鲜美,已成为我国重要的经济类甲壳动物之一。MSTN基因作为一种肌肉抑制激素,参与调控肌肉生长发育。为进一步探究中华绒螯蟹不同MSTN基因型对其生长的影响,了解相关SNP位点是否与生长性状有相关性,有无育种潜力。本文分别对中华绒螯蟹个体循环水养殖系统及池塘群体养殖两种模式下的Es-MSTN基因型与生长表型做了相关分析,并初步观察比较不同基因型在蜕壳过程中的肌肉形态变化。具体的研究内容如下:1.中华绒螯蟹不同MSTN基因型的个体蜕壳与生长差异为探究个体养殖情况下,不同MSTN基因型对中华绒螯蟹生长的影响,本章应用河蟹个体循环水养殖系统,对99只中华绒螯蟹扣蟹进行两个蜕壳周期的饲养观察,将MSTN不同基因型及其组合分别与生长性状进行关联分析,结果发现:MSTN基因型的5处SNP同义突变位点,优势基因分别是C、T、C、A、T,优势基因型分别为CC、TT、CC、AA、TT;经过两次蜕壳,先前育种用的SNP2位点中TC基因型增重率从49.46%降低到了39.29%,平均蜕壳周期从49.09天增加到69.83天;TT基因型增重率从48.09%降低到了38.71%,平均蜕壳周期从51.11天增加到72.38天;CC基因型增重率从52.29%降低到了42.21%,平均蜕壳周期从49.33天增加到68.55天。SNP2位点中3种基因型间的体重、壳长、肥满度、增重率和蜕壳周期无显著差异(P>0.05);第一次蜕壳后,CC/TT/CC/AA/TG基因型的占比最高(23.23%),平均体重与壳长均大于其他基因型,但没有显著差异(P>0.05)。本研究结果表明,MSTN不同基因型对中华绒螯蟹生长与蜕壳方面有一定的影响,可以进一步扩大样本量,挖掘CC/TT/CC/AA/TG基因型及TT基因型的育种潜力。2.中华绒螯蟹不同MSTN基因型的池塘群体生长比较为探究群体养殖情况下,不同MSTN基因型对中华绒螯蟹生长的影响,应用大样本(3个池塘共1195只中华绒螯蟹成蟹),对MSTN不同基因型及其组合分别与生长性状进行关联分析,结果发现:生长相关性状中的体重的变异系数最大,壳长的变异系数最小;雌蟹与雄蟹不同位点基因型与表型性状存在一定差异;雌蟹总群体与雄蟹总群体中,CC/TT/CC/AA/TT和CC/TT/CC/AA/TG两种基因型所占比例最高,CC/TT/CC/AA/TG基因型组合表型值均大于CC/TT/CC/AA/TT基因型组合;表型百分位排序中,CC/TT/CC/AA/TT是正向选择,CC/TT/CC/AA/TG是负向选择,且两种基因型对雌雄的选择强于雄性;散点图曲线拟合中,CC/TT/CC/AA/TT和CC/TT/CC/AA/TG两种基因型壳长与体重关系均为幂函数,且雄蟹拟合曲线K值均大于雌蟹拟合曲线,但雌蟹拟合曲线的R~2均大于雄蟹R~2。本研究结果表明:CC/TT/CC/AA/TT和CC/TT/CC/AA/TG两种基因型为优势基因型组合,具有育种潜力,可进一步加以选择和应用。3.中华绒螯蟹不同MSTN基因型的肌肉组织学观察为探究中华绒螯蟹不同MSTN基因型的肌肉组织的变化特征,本章通过石蜡切片、HE染色及电镜观察,对中华绒螯蟹不同MSTN基因型在不同蜕壳时期螯足肌、步足肌和胸肌进行组织学观察和肌纤维基本形态指标测量。结果显示:中华绒螯蟹不同部位肌肉组织的形态特征不同:步足肌纤维形状较规则,多为椭圆形,排列较紧密;腹肌肌纤维形状不规则,两头尖,多为菱形,排列紧密;螯足肌纤维形状多为椭圆形,排列松散、分离,不形成肌纤维束。通过电镜的超微结构观察,TT基因型(M选育系)与TT/TC基因型(非M对照系)的胸肌肌节与步足肌肌节均为短肌节纤维,长度无显著差异,但M系胸肌肌节厚度明显大于非M系胸肌肌节。不同蜕壳时期的不同部位肌肉组织存在形态特征差异:螯足肌纤维直径与变化范围显著大于步足和胸肌肌纤维。M系肌纤维直径均大于非M系,其中胸肌肌纤维平均直径在M系(205.04±6.64μm)显著高于非M系(186.05±5.35μm)(P<0.05)。本研究结果表明:螯足肌肉在蜕壳前后有显著的形态变化,M系的肌纤维直径明显大于非M系。
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