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目的：通过具有创新性的基因工程手段获得粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因，并将其按照酵母偏爱密码子优化，消除自然序列中存在的发夹结构，然后导入巴斯德毕赤酵母表达系统，使其诱导表达，获得具有生物活性且具有一定经济价值的GM-CSF。
方法：首先从人体基因组克隆得到hGM-CSF全基因，然后通过采用引物5端加长法克隆了含127个编码氨基酸的hGM-CSF，在引物克隆过程中对该基因做了局部的密码子优化。最后通过高保真Taq酶扩增和EcoRI单酶切的方法将该基因整合进毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K，通过电击转化和甲醇诱导筛选，最终获得一株摇瓶水平粗蛋白表达量达3.89g/l的转化子。
结果：PCR、SDS-PAGE与westeran blotting免疫杂交证实hGM-CSF活性正常。SDS-PAGE电泳发现所表达的hGM-CSF均发生了糖基化，通过N-糖苷酶F去糖基化也证实了这点。
结论：本研究成功构建了可高效表达、有效分泌hGM-CSF的重组毕赤酵母工程菌，提供了一条产量高、分离纯化简便，可低成本大规模生产hGM-CSF的新途径。为实现hGM-CSF生产的产业化奠定了基础。