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第一部分 慢病毒载体介导RNA干扰HIF-1α基因对胰腺癌细胞摄取18F-FDG影响的实验研究目的:探讨慢病毒表达载体介导的RNA干扰（RNAi）缺氧诱导因子1-α（HIF-1α）对人胰腺癌细胞Patu8988摄取18F-脱氧葡萄糖（FDG）的影响。方法:构建针对缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）基因的RNA干扰（RNAi）慢病毒表达载体LV-HIF-1αRNAi,分成不同的浓度组（25～200 nmol/L）,采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应（Real-time PCR）、Western blot印迹法观察缺氧状态下Patu8988细胞RNA干扰后HIF-1 α的变化。RT-PCR法检测转染LV-HIF-1 αRNAi后Patu8988细胞葡萄糖转换因子-1（Glut-1）表达情况。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定加入不同量（25～200 nmol/L）LV-HIF-1αRNAi 10 μ1 48 h后细胞抑制率。测定加入不同剂量（25～200 nmol/L）LV-HIF-1αRNAi 100 μl 48 h 后 18F-FDG 细胞结合率。结果:RNA干扰HIF-1α后,缺氧状态下HIF-1αmRNA相对表达量分别为（0.426±0.036）、（0.334±0.031）、（0.262±0.022）、（0.223±0.018）;在缺氧状态下,HIF-1α蛋白质表达下降,表达量分别为（0.672±0.026）、（0.348±0.022）、（0.226±0.016）、（0.164±0.012）。加入25～200 nmol/L LV-HIF-1αRNAi 48h 后,吸光度值分别为（0.836±0.015）、（0.784±0.011）、（0.728±0.009）、（0.658±0.006）,与对照组相比抑制率分别为 20.98%（0.222/1.058）、25.90%（0.274/1.058）、31.19%（0.330/1.058）、37.81%（0.400/1.058）。抑制率随剂量的增加而升高,两者呈正相关关系（r=0.628,P＜0.05）。缺氧条件下用浓度为200nmol/LLV-HIF-1αRNAi转染Patu8988细胞24、48、72h后,Glut-1mRNA表达抑制率与细胞增殖抑制率之间呈正相关关系（r=0.728,P＜0.05）,Glut-1mRNA表达抑制率与18F-FDG细胞结合抑制率呈正相关关系（r=0.746,P＜0.05）,细胞增殖抑制率与18F-FDG细胞结合抑制率之间呈正相关关系（r=0.620,P＜0.05）。结论:缺氧状态下,RNA干扰HIF-1α明显降低Patu8988胰腺癌细胞Glut-1mRNA表达及对18F-FDG的摄取,有望用18 F-FDG显像早期观测LV-HIF-1αRNAi对胰腺癌的治疗疗效。第二部分 氧化石墨烯--聚乙二醇-叶酸-1-芘甲基氯化胺载体介导RNA干扰HIF-1α基因对胰腺癌细胞摄取18F-FDG等生物行为影响的实验研究目的:探讨功能化氧化石墨烯-聚乙二醇-叶酸-1-芘甲基氯化胺（GO-PEG-FA-PyNH2）对人胰腺癌细胞Patu8988生物行为的影响。方法:构建针对缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）基因的RNA干扰（RNAi）功能化氧化石墨烯基因转染微粒GO-PEG-FA-PyNH2-HIF-1αRNAi,采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应（Real-time PCR）、蛋白质印迹法（Western blot）检测Patu8988细胞HIF-1α表达情况,采用RT-PCR法检测转染GO-PEG-FA-PyNH2-HIF-1αRNAi后Patu8988细胞葡萄糖转换因子-1（Glut-1）表达的情况,Transwell侵袭室方法检测Patu8988细胞侵袭能力,MTT法检测转染前后Patu8988细胞增殖变化,流式细胞仪检测Patu8988细胞周期变化情况,用γ计数仪检测其对Patu8988细胞摄取18F-FDG影响。观察GO-PEG-FA-PyNH2-HIF-1αRNAi对荷胰腺癌裸鼠的作用。结果:缺氧或常氧状态下,GO-PEG-FA-PyNH2-HIF-1αRNAi组HIF-1α基因mRNA和蛋白的表达均下降,通过MTT试验,GO-PEG-FA-PyNH2-HIF-1αRNAi实验组吸光度值显著低于阴性对照组（P＜0.05）和空白对照组（P＜0.05）,另外GO-PEG-FA-PyNH2-HIF-1αRNAi实验组G0/G1细胞比例高于阴性对照组（P＜0.05）和空白对照组（P＜0.05）。GO-PEG-FA-PyNH2-HIF-1αRNAi实验组迁移的细胞数远少于空白对照组细胞数（P＜0.05）和阴性对照组细胞数（P＜0.05）。GO-PEG-FA-PyNH2-HIF-1αRNAi实验组Glut-1 mRNA表达较低于阴性对照组（P＜0.05）和空白组（P＜0.05）。GO-PEG-FA-PyNH2-HIF-1αRNAi转染组对 18F-FDG摄取较少于阴性对照组（P＜0.05）和空白组（P＜0.05）。GO-PEG-FA-PyNH2-HIF-1αRNAi转染组较其它组更能抑制肿瘤生长,延长动物模型存活时间（均P＜0.05）。结论:常氧/缺氧状态下,RNA干扰HIF-1α抑制了Patu8988胰腺癌细胞的生长、增殖、侵袭和转移能力,明显降低Patu8988胰腺癌细胞Glut-1mRNA表达及对18F-FDG的摄取,产生明显的抑瘤作用,有希望用18F-FDG 显像早期观察GO-PEG-FA-PyNH2-HIF-1αRNAi对胰腺癌的治疗疗效。