目的：结直肠癌是全世界最常见的恶性肿瘤之一，尽管多项联合检查诊断技术和肿瘤靶向治疗已经有了很大的发展，但在全球范围内，结直肠癌的发病和死亡率仍在不断上升。结直肠癌的发病是一个多因素作用的过程，涉及到多种细胞功能的变化。角蛋白作为细胞骨架的最主要组成部分，在结直肠组织中表达丰富，K18作为其中最主要的角蛋白之一，还可以通过翻译后点特异的磷酸化修饰对细胞周期和凋亡产生影响。K18的磷酸化修饰主要位于N末端33和52位两个丝氨酸残基位点上，磷酸化的K18与多条信号通路相互作用参与细胞功能的调节。近年来的研究发现，自噬水平的变化引起的细胞功能改变是肿瘤发生发展中的重要环节，与结肠癌的发病具有密切关系。本实验拟在以往研究的基础上，研究化疗药物作用下，K18磷酸化以及 K18磷酸化水平的变化对结肠癌细胞凋亡和自噬水平的影响，同时分析其对肿瘤细胞对化疗药物敏感性的影响，为进一步深入研究K18磷酸化的功能及其与肿瘤发生，发展，治疗之间的关系提供可靠依据。　　方法：第一部分实验：用一定浓度梯度的奥沙利铂处理HCT116细胞，Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术和Calcein-AM/PI染色法检测细胞凋亡情况， western blot方法检测磷酸化K18蛋白的表达水平；分别转染绿色荧光蛋白（GFP）、野生型 K18和K18的33、52位丝氨酸（Ser33A、Ser52A）磷酸化位点突变的质粒于HCT116细胞后，用一定浓度的奥沙利铂处理，流式细胞术和Calcein-AM/PI染色法分析K18及其突变质粒的转染对细胞凋亡的影响。　　第二部分实验：分别转染空载质粒、野生型K18和K18的33、52磷酸化位点突变的质粒（Ser33/52A）于HCT116细胞，然后，用60μ mol/L的奥沙利铂处理细胞，并加入3-MA或RAP，流式细胞术和Calcein-AM/PI染色法分析K18及其突变体的转染对细胞凋亡和自噬的影响；Western blot法检测磷酸化K18蛋白的表达水平、自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3（LC3）、beclin-1的表达。　　结果：第一部分：1.奥沙利铂可以使HCT116细胞发生明显的凋亡，而且凋亡比例随着药物浓度的增加而升高；2.K18的Ser33、Ser52磷酸化水平也随着药物浓度的增加而增加；单纯质粒转染的各细胞组之间的凋亡率无明显差异，但经过奥沙利铂处理后，Ser33A和Ser52A质粒转染的HCT116细胞的凋亡率明显低于GFP和K18质粒转染组的细胞凋亡率，转染K18质粒组的HCT116细胞的凋亡率高于GFP转染对照组；Ser33A和Ser52A质粒转染组之间无明显差异。　　第二部分：Ser33/52A质粒的转染可以明显降低K18的磷酸化水平，经过OXA处理后，转染K18质粒组的HCT116细胞的凋亡率显著高于空载质粒对照组，而Ser33/52A质粒转染的HCT116细胞的凋亡率明显低于空载质粒对照组和K18质粒转染组的细胞凋亡率，K18质粒转染组细胞自噬明显高于空载质粒转染对照组，而Ser33/52A质粒转染组自噬水平明显降低；　　结论：1．K18 Ser33和Ser52磷酸化水平随着细胞凋亡水平的增加而增加；　　2．K18过表达提高了HCT116细胞对奥沙利铂的敏感性，而抑制K18 Ser33和Ser52的磷酸化可以减少化疗药物作用下结肠癌细胞的凋亡；　　3．K18过表达可以促进HCT116细胞自噬，提高其对OXA的敏感性；　　4．K18 Ser33和Ser52磷酸化水平的降低可抑制自噬并降低HCT116细胞的凋亡率；　　5．自噬促进作用是 K18磷酸化增强 HCT116细胞对奥沙利铂敏感性的重要组成部分，或许涉及到 p53-ASPP2通路，但并非完全由自噬促进达到。在一定范围内，过度抑制保护性自噬可以促进细胞凋亡，而诱导细胞过度自噬也可以导致细胞自噬性死亡。