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抑肽酶是一种非特异性、多功能蛋白酶抑制剂，广泛应用于临床。目前的提取抑肽酶的方法主要是“二步法”，这种方法存在着污染大、成本高、周期长的缺点。为此，我们以交联壳聚糖微球固定化胰蛋白酶，亲和层析纯化抑肽酶。传统的提取原料主要是牛肺、人尿、胰蛋白酶结晶母液等。但从猪肺中提取抑肽酶，还未有文献报道，我们试探性地从猪肺中提取抑肽酶。实验结果表明：1．用反相悬浮交联法制备出粒度均匀的交联壳聚糖微球，并用其固定化胰蛋白酶，制备新型固定化酶，其最佳固定化酶的条件：用终浓度为0.6％的戊二醛，在50℃下，先处理交联壳聚糖微球6h，再置冰浴中加酶为12mg／g，搅拌24h，固定化酶活性回收率达53.8％。固定化酶的最适温度为80℃、最适pH为8、表观米氏常数（Km）为3.16mmol／L。与壳聚糖作为固定化酶载体相比，新型固定化酶具有吸附容量大、机械强度好、粒度均匀、耐酸碱、对牛血清白蛋白非特异性吸附较弱，洗脱时无明显压床现象等优点。2．以新型固定化酶作为吸附剂亲和层析的牛肺抑肽酶比活力达到4308U／mg，纯化倍数为350，略小于Sepharose 4B为载体固定化酶吸附剂的4593 U／mg，纯化倍数为373。它们的提取效率相当。与Sepharose 4B相比，以交联壳聚糖微球作为亲和层析吸附剂时，洗脱速度快，微球机械强度高，几乎没有压床现象，且能反复使用。3．用亲和层析纯化猪肺粗提液，结果表明，在用（0.5 mol／h，pH 1.5）氯化钠—盐酸溶液洗脱的收集液中，检测到有抑制活性，说明猪肺中也含有胰蛋白酶抑制剂。亲和层析猪肺抑肽酶的最佳条件：固定化酶吸附剂的活力为1526.7U／g、经80目筛的交联壳聚糖微球载体、静态吸附。4．根据电泳图可知，提取的猪肺抑肽酶为单一纯品，相对分子量为11.1KDa，pH在1～11范围内，处理12h，活性不变，但在pH12以后活性就开始下降，当pH13时，活性为pH8.0时的89.7％，而且不同pH对猪肺抑肽酶的影响是可逆的；猪肺抑肽酶经40～90℃水浴处理15min，活性保持不变，在100℃下水浴15min，相对活性是未经处理的96％；猪肺抑肽酶具有一般蛋白所具有的280nm特征吸收峰，表明猪肺抑肽酶中含芳香族氨基酸残基；猪肺抑肽酶对于胰蛋白酶的抑制类型应该为“竞争型”抑制。胰蛋白酶的Km值为1.94*10-3，猪肺抑肽酶抑制常数Ki值远小于Km，小了2个数量级，猪肺抑肽酶是一种对胰蛋白酶有抑制活力很强的抑制剂，是一种较好的胰蛋白酶抑制剂。