前言 甲基汞(Methyl mercury)是一种具有神经毒性的环境污染物，主要来源于氯碱，塑料、电池和电子等工业排放的废水及含汞农药的使用。吸收进入机体的甲基汞，初期主要分布于血液和肝脏，以后向其它器官移行，最后主要分布在肾、肝、脑等组织中。由于甲基汞在体内的肠肝循环和肾脏近曲小管对甲基汞的重吸收效率高，使甲基汞的体外排泄十分困难。 传统的治疗药物如巯基络合剂EDTA，因其促进汞的排泄无特异性，易导致微量元素代谢紊乱，同时也会导致肾脏近曲小管上皮细胞受损伤，甚至产生肾毒性。寻找一种能特异地促进甲基汞排泄的治疗药物是有待解决的问题。许多研究发现在甲基汞重吸收过程中γ-谷胺酰转肽酶(γ-Glutamyl transpeptidase，简称γ-GTP)发挥重要作用。 本研究旨在通过抑制γ-GTP活性，减少谷胱甘肽结合型甲基汞的重吸收，促进甲基汞的排泄，降低肝脏、肾脏中甲基汞含量，达到减轻甲基汞体内负荷的目的，为甲基汞中毒的治疗提供新途径。 材料与方法 1 动物分组、染毒及样品采集 受试小鼠一次腹腔注射氯化甲基汞，剂量为5.0mg/kg，制造甲基汞蓄积模型。5天后将42只模型小鼠按体重随机分为实验前组、对照组、0.3和3.0mg/kg acivicin实验组。受试动物每3天给药一次，实验组皮下注射acivicin，对照组皮下注射生理盐水。 在实验第0天，实验前组小鼠在乙醚麻醉下暴露胸腔，用预冷0． 9％NaCI进行心脏灌洗，直至灌流液无血色，目的是排除血液对 肝、肾汞含量的影响。摘取肝、肾备用。在第12天和第45天染毒 后二小时，分别进行采样，操作方法同实验前组。 2观察指标及检测方法 2．1 动物体重：直接称重法。 2·ZY－GTP活性测定1一谷氨酸对硝基苯胺简易比色法。 用考马斯亮蓝法进行蛋白定量。 2．3 GSH含量测定：DTNB直接比色法。 2．4 甲基汞含量的测定：气相色谱法测定。日本岛津GC－ 14A，‘Wi电子捕获检测器。柱温 195t；检测器 260t；气化室 230t。载气：高纯氮，压强 2．skg／cm＼色谱柱：内径 3nun，长 Zm 的玻璃柱，内装涂有10％KOCL－Hg固定液的60－80目ChrO－ mosorb W AW－DMCS（固定相购于中十。东部株式会社日本人 3统计分析 用SPSS软件对观察指标进行方差分析q检验。 实验结果 三．不同剂量acivicin对小鼠体重影响 Acivicin染毒前和给药期间0．3和3．omg／kg组小鼠体重与对 照组相比均无显著性差异h＞0．05人 2．不同剂量acivicin对小鼠肝、肾Y－G’YP活性影响 第12天和第45天给药后2小时各组小鼠肝脏Y－GTP活性 均无显著性差异师＞0．05X3．om矿kg组小鼠肾脏 Y－GTP活性 明显低于对照组拥＜0．05人 3．不同剂量acivicin对小鼠肝脏、肾脏GSH含量的影响 第12天给药后2小时实验组小鼠肝脏、肾脏GSH含量均显 ·2· 著低于对照组师＜0．05人第 45天给药后 2 ／J＼时实验组小鼠肝 脏、肾脏 GSH含量与对照组相比均无显著性差异师＞0．05人但随 acivicin剂量的增加 GSH含量呈现降低趋势。 4不同剂量眈 kh对小鼠肝、肾甲基汞含量的影响 第12天3．omg／kg组小鼠肝脏甲基汞含量明显低于对照组 （P＜0．05），分别为 0．35和 0．96Pg／gO第45天 0．3和 3．omg／kg 组小鼠肝脏甲基汞含量均低于对照组h＜0．05X分别为 0．05刀． 07和 0．7卜g／g。第 12 天和奥 45天 0．3和 3．omg／kg组小鼠肾脏 甲基汞含量均低于对照组（）别为2．65、2．5、2．88和0．25、0．38。 1．58 Pg／g人但无显著性差异h＞0．05＊随着给药时间的延长和 剂量的增加，甲基汞的含量降低。 讨 论 早在二十世纪五十年代日本发生水侯病后，各国科学家相继 开始了对甲基汞体内代谢的研究。研究发现，甲基汞在体内的吸 收、转运、代谢和排泄均与谷脱甘肽、半脱氨酸等含流基化合物的 转运和排泄有密切关系。v－一谷胺酸转肽酶是一种膜结合酶，在 肾近曲小管的刷状缘含量最丰富，另外在一些参与体液转运和排 泄的上皮细胞也有较高的转肽酶活性，它能使GSH降解为半既氨 酸甘氨酸和半既氨酸，是 GS＊循环中十分重要的酶。体内甲基汞 是以与血浆中GSH结合形式转移至肾脏，GSH和GSH复合物经 由肾小球滤过到肾小管管腔内，其中一小部分随尿排出，大部分在 近曲小管刷状缘Y－GTP、半既氨酸甘氨酸水解酶作用下分解为半 跳氨酸，然后以氨基酸形式吸收到肾细胞内。所以一旦抑制Y－ GTP活性，就会抑制肾脏近曲小管对甲基汞的重吸收，从而降低肾 甲基汞的含量。 本实验中acivicin并没有显著抑制肝脏Y－GTP活性，但第12