不同来源菊花化学成分、抗炎作用及其机理的研究

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本研究系统进行了5个不同来源菊花(滁菊、亳菊、贡菊、怀菊、杭菊)化学成分、无机元素、抗炎药效的比较研究以及部分抗炎机理的研究,探讨不同种、种源对菊花饮片质量的影响,为全面评价菊花的质量优劣提供了科学依据,便于对菊花药材分类的进一步细化和饮片的进一步标准化、规范化。本文首先通过正交试验设计,以菊花中8个主要活性成分和浸出物的含量作为评价指标,优选菊花饮片的最佳提取工艺,为菊花饮片的质量检测提供科学依据。试验优选出菊花的最佳提取工艺:采用超声波提取法,加入30倍80%的乙醇溶液,提取40min,共2次。优化的提取工艺结果可靠,评价指标可控。本文通过5个不同来源菊花的HPLC指纹图谱、UFLC-TOF/MS、GC-MS定性分析,发现不同来源菊花的化学成分存在“质”的差异。通过建立不同来源菊花的HPLC指纹图谱并进行相似度分析、聚类分析和主成分分析,结果表明同一品种的样品之间相似度高,指纹图谱共有模式稳定可靠、专属性强,不同品种中亳菊和滁菊相近、贡菊和杭白菊相近,可能分别来源于相同的种源。通过建立一种准确、快速、高效的UFLC-Q-TOF/MS方法并结合PeakviewTM和MarkviewTM软件分析发现滁菊和亳菊的种质相近,杭菊和贡菊的种质相近,而怀菊经长期自然和人工的选择栽培,种质与其他品种都有不同,主要差异成分为黄酮醇苷类成分、甾醇类成分和酚酸类成分(P<0.05)。GC-MS定性分析共鉴定出156种化学成分,其中滁菊、亳菊、贡菊、怀菊和杭白菊分别为70、58、58、61和76个,所有品种相同成分为15个,3品种以上相同成分为30个,表明5个不同来源菊花虽然在植物学属性上类似,但是其小分子化学构成和含量却有显著性差异。本文通过5个不同来源菊花的HPLC和电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-AES)的定量分析,发现不同来源菊花的主要化学成分和无机元素存在“量”的差异。采用高效液相法所建立的8个活性成分同时测定方法稳定、结果可靠、操作简易,研究结果显示,不同来源菊花中主要活性成分的含量差异甚大,除绿原酸外,其他7个活性成分(木犀草苷、异绿原酸A、芹菜素苷、木犀草素、槲皮素、芹菜素、刺槐素)的含量在不同来源菊花各样品间存在显著性差异(P<0.05),而木犀草苷和木犀草素、芹菜素苷和芹菜素的总含量在不同样品间却无显著性差异。无机元素的ICP-AES定量分析结果显示,亳菊和滁菊中大部分有益元素含量相对于其它品种较高,但同时潜在毒性元素含量也较高。本文通过二甲苯诱发的耳肿胀试验、角叉菜胶致小鼠足趾肿胀试验考察了不同种、种源对菊花药效的影响,并探讨菊花抗炎的部分机制。实验结果显示,亳菊的抗炎效果最好,滁菊的抗炎效果次之,怀菊、贡菊和杭菊的抗炎效果无显著性差异,抗炎效果弱于亳菊和滁菊。其抗炎机理与抑制环氧酶代谢途径、减少PGE2等炎症介质的释放以及减少炎症发生过程中自由基产生有关。
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