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[背景]乳腺癌是一种常见的恶性肿瘤,具有很高的致病率及致死率。寻找有效的治疗靶点对于开发乳腺癌新疗法及更为准确的乳腺癌诊断和预后治疗具有重要意义。miRNA已被证明参与调控多种癌症发展,因而一直是研究人员们寻找肿瘤生物标记物的重点方向。不同类型的miRNA在促进或抑制癌症方面发挥不同的作用。miRNA在肿瘤组织中普遍存在显著的高或低表达,可以影响肿瘤发生发展,从而参与肿瘤的进展过程。深入解析miRNA的分子调控机制有助于我们更为全面的认识和了解乳腺癌的发生机制和发展进程,同时也为发掘新的治疗靶点和诊断方法提供理论基础。[目的]本文的主要目的是探究miR-103a-3p通过ETNK1影响乳腺癌增殖和凋亡的分子机制。[方法]利用乳腺癌基因组图谱（TCGA）数据库分析miR-103a-3p的表达与预后的相关性。我们收集乳腺癌患者临床病理组织,通过qRT-PCR方法检测乳腺癌病人的肿瘤组织以及肿瘤旁组织中miR-103a-3p的表达量。此外,通过检测miR-103a-3p在正常乳腺细胞和乳腺癌细胞系中的表达情况,并由此选择后续实验细胞。对细胞进行转染:inhibitor NC,miR-103a-3p inhibitor,qRT-PCR 检测转染效率。然后,通过克隆形成实验、MTT、TUNEL实验,观察抑制miR-103a-3p后对各转染组MDA-MB-231细胞增殖和凋亡水平的影响。生信网站预测miR-103a-3p和ETNK1的结合位点,通过双荧光素酶报告基因验证二者之间的结合关系。qRT-PCR检测在乳腺癌细胞中差异性表达miR-103a-3p后对其下游靶基因ETNK1的mRNA表达的影响,对蛋白表达的影响则用Western blot来测定。开展细胞挽救实验,对细胞进行分组转染:mimic NC+oe NC、miR-103a-3p mimics+oe NC、miR-103a-3p mimics+oe ETNK1,qRT-PCR 检测转染效率。克隆形成实验、MTT、TUNEL实验观察恢复靶基因ETNK1的表达水平后,MDA-MB-231细胞增殖和凋亡水平的变化。构建稳转 MDA-MB-23 1 细胞系,转染分组:antagomiR-NC+sh-NC,miR-103a-3p antagomir+sh-NC、miR-103a-3pantagomir+sh-ETNK1。然后,通过将稳转细胞系皮下注射裸鼠体内,构建裸鼠皮下移植瘤模型。通过观察各组裸鼠的肿瘤生长状况并记录肿瘤体积,适时解剖,对肿瘤组织进行称重测量。利用qRT-PCR和免疫组化检测肿瘤组织中相关基因及蛋白表达水平。[结果]miR-103a-3p高表达会导致乳腺癌患者预后不良。miR-103a-3p在乳腺癌组织中高表达。miR-103a-3p在乳腺癌细胞系中表达水平显著高于正常乳腺细胞。miR-103a-3p 在 miR-103a-3p inhibitor 转染组乳腺癌 MDA-MB-23 1 细胞系中的表达明显低于inhibitor NC乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞组。比较inhibitor NC组,miR-103a-3p inhibitor组MDA-MB-231细胞增殖水平显著降低,凋亡水平显著升高。miR-103a-3p和ETNK1存在靶向结合的关系,且miR-103a-3p可下调ETNK1表达。比较对照组,miR-103a-3p mimics+oe NC组乳腺癌细胞系中miR-103a-3p的表达明显升高,ETNK1同时降低。与此同时,miR-103a-3p mimics+oe ETNK1组中监测miR-103a-3p表达量不变,ETNK1表达恢复。细胞功能实验结果表明,miR-103a-3p mimics+oe NC组细胞增殖能力升高凋亡水平降低。相较于此,miR-103a-3p mimics+oe ETNK1组细胞增殖能力回落,凋亡水平回升。表明恢复ETNK1表达可逆转miR-103a-3p mimics对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。与对照组相比,miR-103a-3p antagomir+sh-NC组小鼠肿瘤组织体积和质量明显降低,同时发现miR-103a-3p antagomir+sh-ETNK1组裸鼠肿瘤体积和质量有所回升。miR-103a-3p antagomir+sh-NC组裸鼠瘤体组织中,miR-103a-3p表达水平明显下降。ETNK1的mRNA和蛋白表达水平都显著升高;miR-103a-3pantagomir+sh-ETNK1组miR-103a-3p的mRNA表达无明显的差异,ETNK1的mRNA和蛋白表达显著降低。[结论]在乳腺癌组织和细胞中miR-103a-3p显著性高表达,提示miR-103a-3p通常与预后不良相关。miR-103a-3p通过靶向抑制ETNK1在体内外水平参与乳腺癌的发生和发展。