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背景相比于其他类型的乳腺癌,三阴性乳腺癌更易发生局部复发和远处转移,由于缺乏内分泌治疗和抗HER2靶向治疗的机会,目前主要治疗方式仍是化疗。由于治疗方式选择少,预后差,三阴性乳腺癌是乳腺癌治疗领域研究的难点和热点。尼克酰胺-N-甲基转移酶(Nicotinamide-N-methyltransferase,NNMT)是一种重要的甲基转移酶,参与人体内多种药物与化合物的生物转化。研究发现,NNMT在多种类型的肿瘤中高表达,与肿瘤细胞的发生、发展和转移密切相关。本课题组最近的研究发现NNMT在乳腺癌中高表达,通过抑制细胞凋亡、加速细胞周期进程从而促进细胞增殖,然而NNMT在三阴性乳腺癌侵袭转移中的作用尚未见报道,因此NNMT对三阴性乳腺癌侵袭转移的作用以及机制值得深入研究。目的探究NNMT是否影响三阴性乳腺癌细胞的侵袭转移以及其可能的作用机制,为临床上靶向NNMT治疗三阴性乳腺癌提供理论依据。方法1、通过公开的乳腺癌数据库,分析NNMT在三阴性乳腺癌中的表达、NNMT与预后、转移以及转移相关分子的关系。2、收集三阴性和非三阴性乳腺癌组织标本,通过免疫组化检测NNMT的表达,验证NNMT在三阴性乳腺癌中的高表达情况。3、检测各种三阴性乳腺癌细胞系中NNMT表达情况,并构建三阴性乳腺癌细胞NNMT不同表达水平的细胞模型。4、利用上述细胞模型,通过划痕实验、Transwell、Matrigel实验,检测NNMT对三阴性乳腺癌细胞体外侵袭转移能力的影响。5、利用上述细胞模型,通过构建SCID小鼠肿瘤细胞肺转移模型,分析NNMT对三阴性乳腺癌细胞在动物体内转移能力的影响。6、利用上述细胞模型,通过Western blot检测细胞中EMT分子表达,分析NNMT对EMT分子表达的影响,探索NNMT促进三阴性乳腺癌细胞侵袭转移的机制。结果1、大数据分析发现NNMT在三阴性乳腺癌中高表达,并与预后不良及高远处转移相关,与EMT相关分子标志物N-cadherin和Vimentin表达呈正相关。2、我们在临床所收集的乳腺癌患者的肿瘤组织中发现NNMT在三阴性乳腺癌组织中高表达。3、文献数据显示NNMT在三阴性乳腺癌细胞系中高表达,我们检测各种三阴性乳腺癌细胞系验证了NNMT的高表达,并成功构建不同NNMT表达水平的三阴性乳腺癌细胞模型。4、NNMT促进三阴性乳腺癌细胞体外的侵袭转移。5、NNMT促进三阴性乳腺癌细胞在体内的侵袭转移。6、NNMT促进三阴性乳腺癌细胞中EMT的发生,推测是其促进三阴性乳腺癌细胞侵袭转移的机制。结论本研究发现NNMT在三阴性乳腺癌中高表达,并且与三阴性乳腺癌的预后不良及高转移相关。本研究证实了NNMT促进三阴性乳腺癌细胞发生EMT,从而增强三阴性乳腺癌细胞体内体外的侵袭转移能力,这可能是NNMT与预后不良及高转移相关的原因。