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目的:肿瘤在发生发展过程中,机体的免疫系统可以对癌变的组织及已形成的肿瘤发生免疫应答,从而发挥免疫监视及免疫杀伤作用,而CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)在抗肿瘤免疫应答中起着免疫抑制的作用,是维持肿瘤免疫耐受的关键成分。本研究探讨肝癌小鼠脾脏中Treg数量、功能变化以及肿瘤生长与其的关系;探讨微波消融治疗对肝癌小鼠脾脏中Treg数量、功能的影响,并从免疫抑制的角度分析微波消融治疗对肝癌小鼠免疫功能的影响。
方法:
1、采用小鼠肝癌细胞H22接种ICR小鼠,建立肝癌模型。流式细胞术检测小鼠脾脏中CD4+CD25+T细胞、CD25+FOXP3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞的数量;
2、当肝癌小鼠皮下荷瘤直径约1cm时,采用微波治疗仪消融皮下荷瘤。采用流式细胞仪方法检测小鼠脾脏中的CD4+CD25+T细胞、CD25+FOXP3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞的数量。
结果:
1、H22荷瘤小鼠脾脏中CD4+CD25+T细胞、CD25+FOXP3+T细胞的表达显著高于正常对照组;荷瘤小鼠脾脏中CD4+T细胞、CD8+T细胞的表达较正常对照组小鼠明显下降,荷瘤小鼠的CD4+/CD8+明显低于正常对照组小鼠;荷瘤小鼠脾脏中CD4+CD25+T细胞、CD25+FOXP3+T细胞的表达与肿瘤大小正相关;
2、微波消融治疗肿瘤后21天时,微波消融组CD4+CD25+T细胞、CD25+FOXP3+T细胞的表达较荷瘤对照组明显下降,微波治疗28天后其下降更为明显;微波消融治疗肿瘤后小鼠的CD4+/CD8+呈逐渐上升趋势,治疗后第28天有统计学意义。
结论:
1、肝癌小鼠脾脏中CD4+CD25+T细胞、CD25+FOXP3+T细胞的比例较正常对照组显著增高,且均与肿瘤体积呈正相关,提示肿瘤细胞可能促进了Treg的增生及增强其的功能。肝癌小鼠脾脏中CD4+T细胞、CD8+T细胞的数量较正常对照组下降明显,提示肝癌小鼠的细胞免疫功能低下:
2、微波消融治疗肿瘤后,Treg数量下降及功能降低,且CD4+/CD8+比值升高,提示了微波消融治疗肝癌可以改善机体的免疫状态。