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目的：观察重组甲型流感病毒H1N1的基质蛋白1（rM1）和2（rM2）对小鼠气管上皮细胞β-防御素产生的作用，以及基于丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）家族p38、细胞外调节蛋白激酶（ERK1/2）和c-Jun氨基端激酶（JNK)信号通路的作用机制。 方法：体外培养原代小鼠气管上皮细胞，利用抗角蛋白抗体进行免疫荧光鉴定。实验共分为6组：rM1组（200ng/mL）、rM2组（200ng/mL）、病毒组（2×TCID50）、rM1+病毒组、rM2+病毒组、正常对照组。在相同条件下提前1小时分别给予p38抑制剂（SB203580）、ERK1/2抑制剂（UO126）、JNK抑制剂（SP600125）进行信号通路干预。各组均在作用4小时、8小时、24小时后进行相应指标检测。HE染色观察细胞形态学变化，采用RT-PCR、Western blot和ELISA法检测各组β-防御素3、β-防御素4、IFN-γ、P-p38、p38、P-ERK1/2、ERK1/2、P-JNK、JNK各指标的基因和蛋白表达情况。 结果： 1、免疫荧光实验结果可见培养的细胞胞浆中有绿色荧光的角蛋白表达，阳性表达细胞达98％； 2、苏木素-伊红染色（HE染色）结果显示rM1/2和/或病毒干预小鼠气管上皮细胞4h、24h，可见细胞变性，胞浆中出现大小不一的空泡,部分细胞出现核固缩、核溶解等坏死病理改变； 3、RT-PCR实验结果显示，rM1组和rM2组较正常组的Mbd3、Mbd4、IFN-γ基因表达上调（p<0.05）；与病毒组比较，rM1联合病毒组和rM2联合病毒组Mbd3、Mbd4、IFN-γ基因表达上调（p<0.05）；各组间p38、ERK、JNK基因表达水平无明显变化; 4、Western blot实验结果显示，与正常组相比，rM1和rM2组IFN-γ蛋白表达上调（p<0.05）；与病毒组比较，rM1联合病毒和rM2联合病毒组IFN-γ蛋白表达上调（p<0.05）；rM1/2组较正常组、rM1/2联合病毒组较病毒组磷酸化p38、磷酸化JNK表达水平均增加（p<0.05），24h磷酸化ERK与IFN-γ表达水平一致，各组间总p38、总ERK、总JNK蛋白表达水平无明显变化； 5、ELISA结果表明：与正常组比较，rM1和rM2组MBD3、MBD4蛋白表达上调（p<0.05），与病毒组比较，rM1/2联合病毒MBD3、MBD4蛋白表达上调（p<0.05）。 结论： 1、甲型流感病毒可通过激活MAPKs信号通路诱导小鼠气管上皮细胞产生β-防御素3和β-防御素4； 2、通过细胞实验证实重组甲型流感病毒M1和M2在早期（4h、8h）具有增强甲型流感病毒诱导β-防御素3和β-防御素4产生的作用，该作用与MAPKs家族中的p38和JNK激活有关；而在后期（24h）MAPKs家族中的另一蛋白ERK也参与其中。