蔓荆子黄素对人肺癌H322细胞生物学效应机制的研究

来源 :陕西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wh820228
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:该实验采用蔓荆子黄素药液作用于人肺癌H322细胞,探讨蔓荆子黄素抑制人肺癌H322细胞增殖的作用机制,从而为蔓荆子黄素在临床上治疗肺癌提供理论依据。
  方法:采用不同浓度的蔓荆子黄素药液做用于人肺癌H322细胞,并设置1640培养基培养人肺癌H322细胞作为空白对照组。
  (1)应用MTT法检测细胞抑制率,并绘制曲线图,选取蔓荆子黄素最佳的作用浓度及时间;
  (2)通过划痕实验检测蔓荆子黄素对人肺癌H322细胞迁移能力的影响;
  (3)用流式细胞仪检测蔓荆子黄素各浓度组对H322细胞周期的影响;
  (4)用流式细胞仪检测蔓荆子黄素各浓度组对H322细胞凋亡的影响;
  (5)采用Western-Blot法检测相关周期蛋白CDK1的表达;原癌基因c-myc的表达;具有调控细胞周期和细胞凋亡的双重功能Survivin蛋白的表达。
  结果:MTT结果表明:蔓荆子黄素药液可以有效抑制人肺癌H322细胞的增值,并且呈药物浓度依赖性;与空表组相比较,浓度为1umol/L、10umol/L、20umol/L、40umol/L时蔓荆子黄素药液组48h的抑制率分别是:27.46%、27.46%、44.29%、60.32%,蔓荆子黄素药液与空白组对照组比较有显著差异(p<0.05)。
  细胞划痕实验结果表明:蔓荆子黄素药液可以有效抑制人肺癌H322细胞迁移,随着药物浓度的增高,划痕愈合率随之降低,而空白对照组愈合能力最强,蔓荆子黄素与空白组比较具有显著性差异(p<0.05),表明蔓荆子黄素药液能够抑制人肺癌H322细胞迁移;
  流式细胞周期结果表明:蔓荆子黄素药液对人肺癌H322细胞在G2/M期发生阻滞,与空白对照组相比较,浓度为1umol/L、10umol/L、20umol/L、40umol/L时,G2/M期积累的百分比依次为8.65%、8.96%、10.18%、14.48%,蔓荆子黄素组与空白对照组比较有明显差异(p<0.05)。
  流式细胞凋亡结果表明:蔓荆子黄素药液对人肺癌H322细胞具有明显的诱导凋亡作用,空白组、1umol/L、10umol/L、20umol/L、40umol/L的蔓荆子黄素药液组48h的凋亡率分别是:5.1%、6.9%、7.2%、10.2%、12.7%,蔓荆子黄素药液与空白对照组比较有明显差异(p<0.05)
  Western-Blot结果表明:在蔓荆子黄素药液作用48h后,用Westernblot方法检测H322细胞对c-myc蛋白、CDK1、survivin这三种蛋白表达的影响。结果显示:随着蔓荆子黄素浓度的的升高,细胞中c-myc蛋白、survivin蛋白表达降低;CDK1蛋白表达先上升后下降,提示蔓荆子黄素药液通过下调c-myc、survivin蛋白和先上调后下调CDK1蛋白的表达诱导人肺癌H322细胞凋亡。
  结论:蔓荆子黄素药液对人肺癌H322细胞的增值具有明显的抑制作用;蔓荆子黄素药液可以抑制人肺癌H322细胞的迁移;蔓荆子黄素药液作用于人肺癌H322细胞,使得细胞周期阻滞在G2/M期;蔓荆子黄素药液通过下调c-myc、survivin蛋白的表达诱导人肺癌H322细胞凋亡;蔓荆子黄素药液通过下调c-myc、survivin蛋白,先上调后下调CDK1蛋白的表达诱导人肺癌H322细胞凋亡。
其他文献
目的:观察左金丸对PLGC大鼠胃粘膜组织中C-myc、Lgr5、Notch1、Notch4和DLL4等相关信号指标的影响,初步探讨左金丸对PLGC的作用机制,为临床逆转PLGC,进一步预防GC提供理论依据。  方法:本实验采用复合造模法(即MNNG溶液联合酒精,水杨酸钠等)将SD雄性大鼠造成PLGC的动物模型,确认造模成功后使用左金丸对PLGC大鼠进行药物干预。将60只SD雄性大鼠随机分为空白组、
[目的]  通过建立SD大鼠肝郁痰凝型乳腺癌癌前病变模型,观察实验大鼠乳腺组织形态变化、雌激素受体(ERα、ERβ)、孕激素受体(PR)、血管内皮生长因子(VEGF)以及PI3K/Akt信号通路相关蛋白PIK3CA和Akt1的表达,探讨皂翘消癖颗粒对肝郁痰凝型乳腺癌癌前病变的效应及相关分子机制,为其临床应用提供理论依据。  [方法]  SPF级SD雌性大鼠70只,常规适应性饲养1w后,按体重(20
学位
【目的】  探究贝参茱萸方的急性毒性及其抑制H22肝癌小鼠模型肿瘤生长的效果和分子机制,为贝参茱萸方的临床应用及开发用于治疗和改善原发性肝癌患者生存质量的中成药制剂提供理论依据。  【方法】  1.贝参茱萸方的急性毒性研究  (1)预实验将贝参茱萸方浓缩到最大浓度,以0.04ml/g剂量给贝参茱萸方组小鼠灌胃一次,根据预实验是否得出LD50(半数致死量)进行正式实验。  (2)正式实验,以贝参茱萸
学位
背景:放射性肠损伤是指腹腔恶性肿瘤病人在放疗中或放疗后出现的直肠并发症。放射治疗后直肠粘膜在放射线的作用下出现充血、溃烂引起腹痛、腹泻、里急后重、便血等一系列症状,显著降低了患者的生活质量。目前临床针对放射性肠损伤尚无特效药物或治疗手段,单纯运用西药治疗的临床疗效不甚理想。随着近年我国中医药事业的蓬勃发展,中医疗法再度受到临床工作者的重视和肯定。笔者在检索既往运用中药灌肠治疗急性放射性肠损伤的研究
目的:观察宣痹通脉汤对冠状动脉临界病变阳虚痰瘀互结型的临床疗效、Lp-PLA2、常规心电图、运动平板试验结果及中医症候积分的影响,进一步探讨宣痹通脉汤治疗冠状动脉临界病变阳虚痰瘀互结型的作用机制。  方法:采用随机数字表法将符合冠脉临界病变标准的71例患者随机分为研究组36例及对照组35例,对照组根据冠心病二级预防原则给予单纯西药规范化治疗,研究组在对照组的基础上予以宣痹通脉汤(中药颗粒剂)。两组
目的:建立大鼠膜性肾病(MN)模型,验证柴苓益肾汤对大鼠MN抗磷脂酶A2受体抗体(Anti-PLA2R )及蛋白尿的影响,初步探讨其治疗MN的作用机制是否与Anti-PLA2R的表达有关。  实验方法:首先应用阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)建立大鼠MN模型;将健康清洁的3月龄雄性SD大鼠,体重(200±20)g/只,共30只,适应性喂养1周后,随机分为3组:正常对照组、模型组、柴苓益肾汤组(给
学位
目的:1.通过MTT实验,明确在不同浓度的右归丸含药大鼠血清的干预下,不同时间点,对肝肾阳虚型退变髓核细胞的活性及增殖状况的影响;2.比较右归丸含药大鼠血清干预前后肝肾阳虚型退变髓核细胞活性及增殖状况的变化,与活血化瘀组、空白血清组比较,证明中医辨证施治的科学性。  方法:选取2019年6月-2019年12月就诊于陕西中医药大学附属医院脊柱骨科并符合中西医诊断标准的腰椎间盘突出症患者,选择其中中医
学位
目的:分析慢性乙型病毒性肝炎肝硬化、肝癌患者的临床资料,通过单因素分析,Logistic回归分析分析及ROC曲线,探讨乙肝肝硬化、肝癌患者发生肝肾阴虚证的客观指标。  方法:采用回顾性研究,本课题入选的病例来源于近6年陕西中医药大学附属医院、陕西省中医院、空军军医大学第一附属医院、西安市中医医院、西安交通大学第二附属医院、咸阳市中心医院、榆林市中医院、湖北省中山医院门诊病人和住院病人的病例,将患者
疏筋解毒止颤方是王亚丽教授及其课题组通过对帕金森病相关中医药文献的大量研究,结合临床实践观察及实验研究,总结出的治疗PD的有效方剂。在前期的实验研究中发现,疏筋解毒止颤方对PD模型大鼠具有抗炎、抗氧化、抗凋亡保护神经元的作用,同时发现疏筋解毒方可通过对Ft及FP-1的调节来间接控制PD模型大鼠中脑SNC中铁的沉积,从而起到脑保护的作用。小胶质细胞是脑内的炎症和氧化应激细胞,广泛参与了PD发病,在P
学位
目的:(1)探究PCPA造模后不同时程下大鼠下丘脑组织内中枢性神经递质GABA、Ach的动态变化情况,从而进一步探讨二者之间有无相关性。(2)在数据挖掘技术和证素研究思想的基础之上,对古文献资料进行研究,初步整理出失眠中医病性证素的分布特征,并结合当今对失眠相关临床文献资料进行证素研究的结果,进一步探讨与现代医学中失眠的关系。  方法:实验部分:选取大鼠54只,随机分成CC组、SD1d组、SD2d
学位