【摘 要】
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在实施“健康中国”战略的背景下,更准确、快捷、方便地获取符合个人营养和卫生需要的食物,已成为广大消费者追求的目标。因此,挖掘具有特定营养健康功效的食品已成为食品科学领域的研究热点。研究表明,富含生物活性物质和抗氧化剂的食物对氧化应激以及其他原因引起的炎症反应具有良好的保护作用。驼乳不仅以其独特的营养价值而受到广大消费者的青睐,更因为它含有丰富的生物活性物质而使其具有广泛的医药功效和生物学作用。已有
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在实施“健康中国”战略的背景下,更准确、快捷、方便地获取符合个人营养和卫生需要的食物,已成为广大消费者追求的目标。因此,挖掘具有特定营养健康功效的食品已成为食品科学领域的研究热点。研究表明,富含生物活性物质和抗氧化剂的食物对氧化应激以及其他原因引起的炎症反应具有良好的保护作用。驼乳不仅以其独特的营养价值而受到广大消费者的青睐,更因为它含有丰富的生物活性物质而使其具有广泛的医药功效和生物学作用。已有研究证实抗炎治疗对肝脏疾病有益,目前开发的免疫分子抑制剂可以有效地减少肝脏炎症对肝细胞和组织造成的损伤。因此,寻找抗炎药物靶点,开发基于炎症反应途径的新型免疫分子抑制剂或促进剂,对于酒精性肝病(Alcoholic Liver Disease,ALD)治疗药物和策略的开发具有重要意义。本研究将ICR雄性小鼠随机分为4组,即正常组(NC)、模型组(ET)、驼乳组(CM)、驼乳干预组(ET+CM)。采用短时间灌胃大量(7.3 g/kg)酒精方式建立急性酒精肝损伤模型并灌胃驼乳进行干预。试验结束后,通过测定血清中谷丙转氨酶(Alanine Aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartate Aminotransferas,AST)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor,TNF-α)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白介素-10(Interleukin-10,IL-10)和白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)水平以及肝脏中甘油三酯(Triglyceride,TG)、总胆固醇(Total Cholesterol,TC)、高密度脂蛋白(High-density Lipoprotein,HDL-C)、低密度脂蛋白(Low-density Lipoprotein,LDL-C)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione Peroxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)和还原型辅酶Ⅱ(Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate,NADPH)水平,同时观察肝脏组织病理切片分析驼乳对小鼠酒精性肝损伤的保护程度。并基于转录组学的研究技术探讨了驼乳干预急性酒精性肝损伤炎症反应的作用及其机制。主要研究结果如下:1.在小鼠肝脏损伤、氧化应激和脂质代谢方面,与模型组相比,驼乳干预组小鼠肝脏损伤有所减轻,血清ALT和AST水平显著降低(p<0.05);肝脏组织中TC、TG、LDL-C、ROS、MDA和NADPH水平显著降低(p<0.05),而HDL-C、GSH、GSH-Px和SOD水平显著升高(p<0.05)。病理组织学的结果显示,驼乳干预组小鼠肝小叶结构清晰,且肝索比模型组的更加完整和清晰,肝细胞水肿明显得到改善,肝脏内脂滴明显减少,肝脏脂质蓄积有所减轻,炎性细胞浸润明显减少,表明驼乳能够抵制氧化应激,减轻肝脏脂肪变性,对酒精性肝损伤有缓解作用。2.经驼乳干预后,血清促炎因子IL-6、IL-1β和TNF-α含量显著降低(p<0.05),抗炎因子IL-10含量显著升高(p<0.05)。TUNEL染色显示,驼乳干预组小鼠肝组织中有少量的荧光点,基本无肝细胞凋亡情况,表明驼乳中抗炎物质通过调节炎细胞因子,抑制肝细胞凋亡从而缓解肝损伤炎症反应,起到保护肝脏的作用。3.转录组结果显示,ET组和ET+CM组共检测出1426个差异表达基因(其中673个为上调基因,753个为下调基因)。注释和富集结果表明,差异基因主要富集在与免疫和炎症调节过程相关MAPK(IL-1R1、TNFR、ATF-2、ERK、JIP3、Ju D)、Toll样受体(TLR5、TLR9、CD14、ERK、PIK3R1、IL-1β、IL-6)和NF-κB(TNFR、CD14、NF-κB、Bcl-2、IL-1β、TNF-α)信号通路。进一步利用q PCR对代表性的IL-6、IL-1β、TNF-α、CD14、TLR5、TLR9、NF-κB和Bcl-2进行验证,结果表明驼乳主要通过调控炎症相关MAPK、Toll样受体和NF-κB信号通路上的基因表达来缓解酒精诱导的炎症反应。综上所述,驼乳能有效地抑制急性肝脏损害的炎症反应。该研究为开发以炎症反应通路为基础的免疫分子抑制剂抗炎药物的研制提供了另一种途径,并为今后临床治疗ALD提供了新的思路。
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