实验背景及目的 肺癌是起源于支气管表面上皮或粘液腺体的上皮细胞癌,非小细胞肺癌占肺癌总数的75%～80%。非小细胞肺癌已经成为人类癌症死亡的主要原因之一,其五年生存率仅15%。临床上许多非小细胞肺癌患者就诊时已处于晚期,丧失了手术时机。放疗、化疗或两者联合,均被用于治疗丧失手术时机的晚期非小细胞肺癌。但是非小细胞肺癌是一类放化疗均较抗拒的肿瘤,如何提高非小细胞肺癌辐射敏感性或化学敏感性是肿瘤学和放射生物学研究的一个重点。 转录信号转导子与激活子（Signal transducers and activators of transcription 3, STAT3）通路受细胞因子与生长因子的刺激而活化,参与调节细胞的增殖、分化与凋亡。STAT3因可以介导细胞的恶性转化而被确认为是癌基因。 大量的研究表明肺癌组织中STAT3蛋白表达明显高于癌旁组织,低分化肺癌组织中STAT3表达水平明显高于高分化肺癌组织,有淋巴细胞转移的肺癌组织中STAT3表达明显高于无淋巴细胞转移肺癌组织。STAT3过度表达可能在肺癌的发生发展中起着重要作用。 反义技术是采用反义核酸分子抑制、封闭或破坏靶基因组的技术手段,包括反义DNA、反义RNA及核酶等。反义分子通过与靶基因异性互补配对结合,阻断靶基因的复制、转录或翻译过程。本研究应用阳离子脂质体介导STAT3反义寡核苷酸转染A549人肺腺癌细胞,以评价STAT3反义寡核苷酸对A549人肺腺癌细胞增殖抑制作用及辐射增敏作用。 实验方法 从2004年6月至2004年11月于解放军第二军医大学放射医学教研室,设立STAT3正义寡核苷酸转染组和空白组作对照,应用阳离子脂质体介导STAT3反义寡核苷酸转染A549人肺腺癌细胞,Western Blot检测STAT3总蛋白、p-STAT3蛋白的水平;MTT法检测细胞增殖状态;流式细胞术检测细胞周期;用克隆形成分析和SF₂研究A549人肺腺癌细胞辐射敏感性的变化。