利用真核表达载体制备DNA疫苗和真核重组亚单位疫苗是临床生产中防治病毒感染的极具潜力的重要手段，能否利用它们制备出J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的具有保护性疫苗抗原尚未见报道。　　本研究利用PVAX-1载体和毕赤酵母表达系统分别构建了PVAX1-gp85 DNA表达载体和pPIC9-gp85蛋白表达载体;对构建的PVAX1-gp85 DNA表达载体转染哺乳动物Hela细胞和鸡成纤维细胞(CEF)，再与核酸佐剂联合免疫雏鸡，观察对血清抗体的诱导效果;对pPIC9-gp85蛋白表达载体转染至酵母感受态GS115中，用一定浓度的甲醇诱导，得到特异性gp85重组蛋白;通过多次免疫家兔，制备抗ALV-Jgp85的血清，使用ELISA检测血清抗体效价和间接免疫荧光试验(IFA)检测制备抗体的特异性;同时，利用其作为免疫原联合不同佐剂免疫7日龄雏鸡，动态检测血清抗体以及攻毒后的病毒血症、免疫器官发育变化等指标分析其免疫保护效果，并经体外病毒中和试验和IFA检测血清中的中和抗体。　　试验结果表明，(1)PVAX1-gp85真核质粒构建成功，并能在Hela细胞和CEF细胞内特异性表达，免疫雏鸡后诱导产生血清抗体显著高于对照组和空载体质粒免疫组;在整个试验观察期，有9只鸡只（约82％）产生明显的抗体反应，有2只（约27％）始终没有产生抗体反应，病毒血症检测免疫保护率为75％。(2)凝胶电泳和基因测序表明用于酵母表达的pPIC9-gp85重组真核表达载体构建成功，Western-blotting结果证明能够表达gp85目的蛋白，使用该蛋白免疫家兔后能产生高效价抗gp85蛋白的血清抗体;使用酵母表达重组蛋白联合两种佐剂免疫雏鸡后，抗体产生比蛋白免疫组要早，且抗体效价高，维持时间长;加强免疫也进一步促进抗体的生成，维持时间进一步延长，抗体阳性率最高达86％(6/7)和89％(8/9)，对攻毒后的免疫保护率为67％和75％。(3)血清抗体体外病毒中和试验结果表明，未用免疫血清中和的三个剂量的ALV-J毒株在细胞增殖的5d内均被检测出;对较低剂量的（101.625 TCID50或102.625 TCID50）病毒，使用免疫雏鸡的抗血清中和后，在5d内均未检测出;对于较高剂量的(103.625 TCID50)病毒，使用不同滴度的抗血清的中和后先后被检测出，呈现与抗血清滴度明显的相关性。通过IFA检测表明，抗血清中含有中和病毒Ig抗体，证实其对病毒的直接作用。本研究为进一步开展J亚群禽白血病的DNA疫苗和亚单位疫苗的应用研究提供物质基础，也为其ALV-J疫苗抗原制备提供了新的技术方法。