作为一种新型的动物饲料添加剂,那西肽在畜禽和水产养殖业中获得了广泛的应用。然而,不规范使用或过度使用可能导致那西肽在动物源性食品中残留严重,甚至超标,从而对人类的身体健康构成潜在的危害。本研究分别基于分散固相萃取法和碱水解法,建立了高效、灵敏与可靠的测定饲料中那西肽含量和动物组织中那西肽残留的分析方法,为那西肽的分析测定提供了新技术和新手段。建立基于分散固相萃取-高效液相色谱-荧光检测法测定动物饲料中那西肽的分析方法。试样经乙腈-0.1%甲酸水溶液（8:2,v/v）提取,然后采用Silica填料作为吸附剂进行分散固相萃取,离心后,过膜上机检测。使用乙腈和5 mmol/L乙酸铵水溶液（含0.1%甲酸）作为流动相,那西肽经Agilent Poroshell 120 EC-C8色谱柱（250 mm×4.6 mm i.d.,4μm）分离,等度洗脱。结果表明,那西肽在50～1000μg/L的浓度范围内线性良好,相关系数（r）大于0.999。在0.5、2.5和5.0 mg/kg三个浓度添加水平下,五种动物饲料样品中那西肽的批内回收率在78.5%～96.8%之间,批间回收率在84.9%～94.2%之间,批内和批间相对标准偏差均低于15%,检测限和定量限分别在17～35μg/kg和50～100μg/kg范围内。该方法的选择性好,准确度和精密度高,适用于实际动物饲料中那西肽的常规检测与监测。基于碱水解的原理,建立了一种高效液相色谱-串联质谱法间接测定动物组织中那西肽残留的分析方法。鉴于那西肽在电喷雾电离和大气压化学电离条件下均不能电离,而那西肽在碱性条件下水解可以生成多种小分子化合物,其中,4-羟甲基-3-甲基吲哚-2-甲酸（HMIA）片段在电喷雾电离模式下具有良好的质谱信号。基于此,本研究通过测定HMIA实现对那西肽的间接分析。组织试样采用1 mol/L氢氧化钠溶液水解,正己烷除脂,MAX固相萃取小柱净化和富集,吹干洗脱液,残渣用50%甲醇水复溶,过膜上机检测。采用乙腈和水作为流动相,目标物经Phenomenex Luna C18色谱柱（150 mm×2.1 mm i.d.,5μm）分离,梯度洗脱,在电喷雾电离负离子模式下进行多反应监测分析。实验结果表明,在2～500μg/kg的浓度范围内,那西肽的浓度与HMIA的色谱峰面积之间线性良好,相关系数（r）大于0.99。在2（4）、10、20和30μg/kg四个浓度添加水平下,那西肽在五种动物组织（猪肉、鸡肉、鱼肉、鸡肝和鸡肾）中的平均回收率为75.3%～108.0%,相对标准偏差均低于15%,检测限为0.7～1.5μg/kg,定量限为2～4μg/kg。该方法科学、灵敏、可靠,选择性高和实用性强,可有效监测动物性食品中的那西肽残留,有利于那西肽的药代动力学和残留消除的研究。