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目的:DNA甲基化是一种调节基因表达的重要机制,在肿瘤发生、发展中起重要作用。研究表明,在肿瘤诊断、预后及疗效判断方面,DNA甲基化是一种有潜在应用价值的肿瘤标志物。本研究运用自行建立的实时荧光定量PCR甲基化检测方法,检测前列腺癌患者外周血游离DNA中谷胱苷肽-S-转移酶P1(GSTP1)基因启动子区域甲基化表达情况,探讨其在前列腺癌早期诊断中的价值。方法:收集入院治疗的患者的外周血样本,每位患者各2管,约2ml/管,置于-80℃超低温冰箱冻存。其中符合入组标准的样本分别为:行前列腺癌内分泌治疗患者58例作为A组,患者年龄波动于61~82岁,平均年龄72岁;因“排尿困难,发现PSA升高”入院就诊的患者42例作为B组,其中23例诊断为前列腺癌(B1),19例诊断为非前列腺癌(B2),B组年龄波动于55~78岁,平均年龄70岁;非前列腺疾病患者34例作为C组,PSA在正常参考值范围内,为同期因尿道狭窄、肾结石、肾囊肿等良性疾病就诊的男性患者,其年龄波动于58~76岁,平均年龄68岁。运用甲基化特异性PCR法对三组患者GSTP1基因的表达情况进行定性检测,运用定量PCR检测GSTP1基因的甲基化相对表达量,统计分析其与前列腺癌患者主要临床病理特征之间的关系。结果:1.A组患者外周血游离DNA中GSTP1基因的甲基化相对表达量(M/U)为0.330973310±0.1848315242,B2组患者的相对表达量为1.585767684±0.8382501872,C组患者的相对表达量为2.354086941±2.1664719163,Welch检验P=0.000<0.05,所以A、B2、C三组总体均数不全相等。两两比较,A、B2两组总体均数间存在显著差异(P=0.000);A、C两组总体均数间存在显著差异(P=0.000);B2、C两组总体均数间不存在显著差异(P=0.230)。可认为A组患者GSTP1基因甲基化比值低于B2、C两组。2.B1组患者GSTP1基因的甲基化相对表达量(M/U)为0.304547000±0.1905957866,与B2组比较分析,Welch检验P=0.000<0.05,两组总体均数间存在显著差异。3.A组患者与B1组患者GSTP1基因的甲基化相对表达量比较分析,采用独立样本t检验,P=0.806>0.05,两组总体均数间无显著差异。4.前列腺癌患者GSTP1基因甲基化程度与相应PSA相关性分析,Kendall’tau_b、Spearman’rho两种非参数方法检验,Kendall相关系数为0.198,Spearman相关系数为0.263,均为P<0.05,提示前列腺癌患者外周血游离DNA中GSTP1基因甲基化相对表达量与PSA相关性不显著(相关系数小于0.5)。5.Gleason评分为5~7分和8~10分的GSTP1基因甲基化程度总体均数间无显著差异(P=0.930),危险度分级为中低危和中高危的GSTP1基因甲基化程度总体均数间无显著差异(P=0.241)。结论:1.前列腺癌患者和前列腺良性病变患者外周血游离DNA中GSTP1基因均存在甲基化和非甲基化表达;2.前列腺癌患者外周血游离DNA中GSTP1基因甲基化表达量比值(M/U)较低,而良性病变患者(BPH等)的甲基化比值较高,推测是机体对肿瘤产生的反馈性保护作用;3.内分泌治疗对前列腺癌患者外周血游离DNA中GSTP1基因甲基化相对表达量无影响;4.前列腺癌患者外周血游离DNA中GSTP1基因甲基化相对表达量与PSA相关性不显著(r<0.5),可将其作为筛查前列腺癌的独立生物标记物;5.检测患者外周血GSTP1基因甲基化相对表达量,虽然对前列腺癌的Gleason评分和危险度分级无预测作用,但对提高前列腺癌早期诊断准确率有一定价值。